本论文对庆大霉素的可视化免疫快速检测方法进行了系统研究,分别采用¨免疫层析试纸条及免疫亲和柱的检测方法检测动物源性庆大霉素贱留。采用20nm的胶体金标记庆大霉素多克隆抗体,戊二醛二步法偶联卵清蛋白制成庆大霉素包被抗原,采用柠檬酸三钠还原法制备粒径为20nm胶体金,经过一系列优化,最终确定胶体金标记抗体最适pH为8.5,最佳抗体标记量为25μg。根据最优条件成功制得胶体金标记抗体。以硝酸纤维素膜为固相载体,以包被抗原和羊抗兔二抗分别作为检测线和控制线,金标记抗体喷涂在玻璃纤维素垫上,制得快速检测庆大霉素免疫层析试纸条。本实验优化建立的庆大霉素胶体金免疫层析方法操作简便、快速,10min内即可得到检测结果,检测限为25μg/L；同时与同类兽药及其他族常用兽药均无交叉,有良好的特异性。选取牛奶、牛肉、猪肉、猪肝、猪肾、鸡肉、鱼肉、鸡蛋作为检测样品。所有样品不需要有机溶剂前处理,添加三个不同浓度的庆大霉索,经过简单的处理即可上样检测,并得到与标准溶液梯度检测近似的结果。方法在牛奶中检出限为100μg/L,牛肉、猪肉中检出限为50μg/kg,在其它样品中榆出限为100μg/kg,均低于最高残留限量。与酶联免疫分析方法的一致性较好。试纸条在4℃下密封干燥条件下至少可保存2个月。所研制的试纸条无需任何检测仪器,操作快速,准确,适用于动物源性食品中庆大霉素贱留的现场大量筛选。本研究采用溴化氰活化的琼脂糖凝胶作为固相载体分别偶联了抗庆大霉素多克隆抗体及抗HRP多克隆抗体作为检测层和对照层组装成的免疫亲和检测杜,所建立的方法检测限为10μg/L,全部检测时间在10min内完成,显色时间为4min。首次使用这种方法对牛奶、牛肉、猪肉、鸡肉4种动物源性食品的庆大霉索残留进行检测。所有样品用PBS直接稀释10倍进行提取,方法对所有检测样品的检出限100μg/L (μg/kg)。免疫亲和柱快速检测方法简便、快速,为新型的可视化快速检测技术提供了新的思路。