慢性阻塞性肺疾病患者GITR、GITRL表达的研究

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目的:以慢性阻塞性肺部疾病稳定期患者为研究对象,探讨在慢性阻塞性肺疾病发展的过程中,其肺组织GITR(Glucocorticoid-induced TNFR family-relatedreceptor,糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体)、GITRL(Glucocorticoid-induced TNFRfamily-related receptor ligand,糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体相关配体蛋白)表达水平。COPD为全身免疫炎症反应,涉及大量炎性细胞及介质,其中TH17/Treg失衡起着重要的作用,TH17可分泌大量炎性因子从而加重炎性反应,而Treg(调节性T细胞)起着抑炎的作用;目前很多证据考虑其为自身免疫反应,因其有家族聚集倾向并且在COPD患者体内有针对弹性蛋白抗体。现已有文献证实GITRL可促进P38MAPK的磷酸化和STAT3的活化,进一步促使TH17细胞增值,分泌更多的IL-17(白介素-17),从而加重自身免疫反应。然而GITRL在COPD患者中是否表达尚不清楚。因此,我们观察GITR、GITRL在COPD患者中的表达情况,分析两者在COPD的发展中起到何种作用。  方法:从2015年3月至2016年3月,收集我院胸外科的肺癌患者手术术后的肺组织,根据病史收集、肺功能、问卷调查评估及是否存在气流受限分为对照组即不患COPD组(21例)、COPD组即COPD合并肺癌组(41例)。术后切除标本需远离肺癌病灶处(距离肿瘤组织>5cm),分别留取新鲜组织于-80℃和常规石蜡包埋处理。  1、HE染色观察肺组织的病理改变,分析比较两组组织结构和炎症细胞形态变化。  2、通过Real-Time PCR技术,检测对照组、COPD组的患者的肺实质组织中GITR、GITRL的mRNA的水平。  3、通过免疫组化技术检测GITR、GITRL、IL-17在对照组、COPD组的患者的在气道、肺实质组织的表达及定位情况。  4、统计学分析:试验数据以mean±sem(平均数±标准差)表示。统计学分析采用GraphPad软件。两组间数据比较用独立样本T检验,多组间比较采用one-wayANOVA分析,P<0.05表明差异有统计学意义。  结果:1、COPD患者GITR、GITRL mRNA水平高于对照组(P<0.05)。2、免疫组化结果提示,GITR、GITRL在气道上皮的表达强于COPD组(P<0.05)并且在APCs上也有表达。  结论:COPD患者肺实质内炎症细胞GITR、GITRL呈高表达趋势,同时也伴有mRNA水平的增加。本研究通过对相关因子的检测,为COPD的发展提供一个新想法。若要探讨具体机制及涉及的相关通路,仍需后续细胞生物学研究支持这一证据。
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