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目的研究T-Box转录因子Brachyury基因与脊索瘤细胞凋亡之间的关系。采用RNA干扰技术（RNAi），构建表达si-Brachyury的重组慢病毒pLenti-Bra-shRNA，转染脊索瘤细胞系CHZP后，研究化疗药物对RANi后细胞的杀伤效果，并探讨其可能的分子机制。研究共分三部分：第一部分Brachyury基因干扰载体的构建及其对细胞凋亡能力的影响；第二部分Brachyury基因干扰及过表达慢病毒载体的构建及相关脊索瘤细胞系CHZP稳转株的建立；第三部分Brachyury基因干扰脊索瘤稳定转染株凋亡能力检测及相关分子机制。方法查询Brachyury基因全长片段，设计针对Brachyury基因的siRNA序列，合成后通过脂质体转染法瞬时转入人非小细胞肺癌细胞H460， PCR检测Brachyury基因在mRNA水平上的表达，筛选出有效干扰位点用于慢病毒包装。用细胞凋亡诱导剂紫杉醇处理RNAi后细胞，观察其凋亡能力变化。确定有效干扰片段后，构建慢病毒表达载体pLenti-Bra-shRNA及pLenti-Bra-NC并感染脊索瘤细胞系CHZP。应用灭稻瘟素筛选，获得细胞稳转株CHZP-Bra-shRNA及CHZP-NC，荧光定量PCR和Western Blot检测Brachyury在mRNA水平和蛋白水平上的干扰效率。采用不同浓度梯度紫杉醇溶液处理脊索瘤细胞系CHZP，CCK-8试剂盒筛选紫杉醇诱导脊索瘤细胞凋亡的最佳浓度值。紫杉醇处理CHZP-Bra-shRNA及CHZP-NC细胞，AnnexinⅤ-FITC/PI染色后，流式细胞仪分析细胞凋亡情况。荧光定量PCR检验CHZP-Bra-shRNA及CHZP-NC中凋亡相关基因的表达量变化情况。结果成功设计了针对Brachyury基因的siRNA干扰片段，转染入H460细胞后通过检验其干扰效应筛选出最佳干扰片段Bra-siR-4(1093T)。应用凋亡诱导剂后，可见Brachyury基因干扰的H460细胞凋亡率明显增高。构建基于筛选出的有效干扰片段的慢病毒载体，感染脊索瘤细胞系CHZP并构建成功其稳转株，荧光定量PCR检测其抑制效率为68.9%，Western-blot检测见目的基因得到特异高效的沉默，证明pLenti-Bra-shRNA慢病毒载体构建成功，能够稳定转染脊索瘤细胞且稳定表达siRNA。针对脊索瘤细胞系CHZP的紫杉醇浓度的筛选确定其有效药物浓度为1μmol/L。紫杉醇处理CHZP-Bra-shRNA及CHZP-NC细胞，流式细胞仪测定，显示CHZP-Bra-shRNA细胞凋亡率为78.38%，CHZP-NC细胞凋亡率为4.1%，二者相差明显，结果具有统计学意义（p<0.05）。凋亡相关基因bax、bcl-2、bcl-xL的PCR检测显示CHZP-Bra-shRNA组的bcl-2基因表达明显下调。结论我们首次把慢病毒介导的RNAi技术应用于脊索瘤凋亡的相关研究，并且在细胞学及分子生物学层面证明了rachyury基因与脊索瘤细胞凋亡关系。经实验证实，Brachyury基因的抑制可降低脊索瘤细胞对于凋亡诱导剂的耐受程度，进一步研究证实Brachyury基因可能通过bcl-2通路对肿瘤细胞的凋亡进行调控。本研究为肿瘤尤其是脊索瘤的基础研究和临床治疗提出了新的思路，进一步深入进行相关信号通路的检测，可能揭示其调控细胞凋亡的具体分子机制，从而为Brachyury作为脊索瘤治疗的分子靶标提供实验依据。