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背景:炎症损伤是加重脑缺血性再灌注损害的主要因素之一。而小胶质细胞作为脑内常驻的免疫细胞在缺血性脑卒中引发的炎症反应中起着至关重要的作用。内源性抗氧化蛋白酶Peroxiredoxin-6(Prdx6)在细胞和动物模型中都被证明具有保护作用。然而,Prdx6的磷脂酶A2(PLA2)活性还没有得到深入的研究,尤其它在脑缺血再灌注损伤中的相关作用及机制还未见报道。目的:探讨小胶质细胞Prdx6-iPLA2对氧糖剥夺再复氧复糖(Oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的神经元炎症损伤及作用机制。方法:(1)构建四条Prdx6 Si RNA(Y2089,Y2090,Y2091和Y2092)慢病毒干扰片段,感染已分离纯化过的小胶质细胞,在倒置荧光显微镜下观察小胶质细胞形态和感染效率,用RT-qPCR和Western Blot方法检测病毒的干扰效率,并筛选出最佳的一条干扰片段。(2)构建一条没有磷脂酶a2活性的prdx6-ipla2sirna慢病毒干扰片段,与已筛选出的干扰片段同时感染小胶质细胞,以达到抑制prdx6-ipla2活性的目的,并建立小胶质细胞-原代神经元共培养ogd/r模型。(3)对小胶质细胞进行mj33预处理,并建立共培养ogd/r模型。(4)运用mts和ldh测定共培养系统中神经元活性和损伤程度。(5)用elisa检测共培养液体中炎症因子白介素1β(il-1β),白介素17(il-17)和白介素23(il-23)的含量。(6)westernblot检测tolllikereceptor2/4(tlr2/4),nf-κbp65,inducibenitricoxidesynthase(inos)和cyclooxygenase(cox-2)的蛋白水平。结果:(1)慢病毒载体感染小胶质细胞后,其中y2091片段的感染效率最佳。(2)mts和ldh结果显示,干扰小胶质细胞中prdx6-ipla2和加入mj33后,神经元的存活率增加,ldh释放减少。(3)elisa检测结果显示,干扰小胶质细胞prdx6-ipla2和加入mj33后,培养基中炎症因子释放减少。(4)Western blot检测结果显示,干扰小胶质细胞Prdx6-iPLA2或者加入MJ33均可降低小胶质细胞中炎症蛋白TLR2/4,NF-κBp65,iNOS和COX-2的表达水平。结论:(1)小胶质细胞Prdx6-iPLA2可诱导氧糖剥夺神经元的炎症损伤反应,其机制与TLR2/4信号通路及下游炎症因子的激活相关。(2)MJ33抑制剂与干扰Prdx6-iPLA2结果类似。