电针和CO2激光灸对奥沙利铂所致周围神经毒性大鼠的外周保护机制

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【目的】观察电针与CO2激光灸对于奥沙利铂所致的周围神经毒性大鼠的缓解作用及其外周保护机制,为临床针灸缓解化疗药副作用方面提供更有效的治疗方案及实验依据。【方法】将雄性SD大鼠40只随机分为4组,分别为空白对照组、模型组、电针组和CO2激光灸组,每组各10只。除空白对照组外,其余各组自实验第1d起进行奥沙利铂溶液腹腔注射2 mg/kg,隔天1次,一共4次。空白对照组以同样的方法进行等体积5%葡萄糖溶液腹腔注射。造模4次后(第8d),进行电针和CO2激光灸双侧足三里穴的治疗,设置电针模式为1 m A,2 Hz,30 min/次,CO2激光灸功率为80 m V,15 min/次,两组治疗均为隔天1次,一共7次。每一组大鼠都在每次腹腔注射以前以及每一次治疗结束以后1 h,进行相关行为学检测,包括:机械性痛觉敏化测试、冷刺激敏感度测试、皮肤血流灌注量检测,并于第7次治疗后,取腹主动脉血观察血清ET、VEGF、NGF含量变化,并在透射电镜显微镜下观察大鼠坐骨神经以及DRG的形态学改变,Western blot法测定坐骨神经NGF、Ca N、HO-1以及L4~L5背根神经节NGF、Ca N、TRPA1的蛋白表达情况。【结果】(1)机械性痛觉敏化程度:模型组、电针组、CO2激光灸组与空白对照组比较,均P<0.01,有显著性差异。电针组与模型组、CO2激光灸组比较,均P<0.05,有统计学差异。CO2激光灸组和模型组比较,P>0.05,无统计学意义。(2)冷刺激敏感度:模型组、电针组与空白对照组比较;电针组、CO2激光灸组与模型组比较,均P<0.01或P<0.05,有统计学差异。CO2激光灸组与空白对照组比较;CO2激光灸组与电针组比较,均P>0.05,无统计学意义。(3)皮肤血流灌注量:模型组、电针组、CO2激光灸组与空白对照组比较;电针组、CO2激光灸组与模型组比较,均P<0.01,有显著性差异。CO2激光灸组与电针组比较,P>0.05,无统计学意义。(4)透射电镜下坐骨神经与背根神经节的形态学改变:模型组大鼠与空白对照组大鼠比较后发现,坐骨神经出现比较了比较严重的髓鞘变性、背根神经节神经元中的神经体、核、仁均有不同程度的固缩及线粒体肿胀。(5)血清ET:模型组、电针组、CO2激光灸组大鼠血清ET含量与空白对照组比较;CO2激光灸组与模型组、电针组比较,均P>0.05,无统计学意义。电针组与模型组大鼠血清ET含量比较,P<0.05,有统计学差异。(6)血清VEGF:模型组、电针组大鼠血清VEGF含量与空白对照组比较;电针组与CO2激光灸组比较,均P>0.05,无统计学意义。CO2激光灸组与空白对照组大鼠血清VEGF含量比较;电针组、CO2激光灸组与模型组比较,均P<0.05,有统计学差异。(7)血清NGF:各组大鼠相比均P>0.05,无统计学意义。(8)坐骨神经NGF蛋白的表达情况:模型组、电针组大鼠坐骨神经NGF蛋白表达与空白对照组比较;电针组、CO2激光灸组与模型组比较,均P>0.05,无统计学意义。CO2激光灸组与空白对照组、电针组比较,均P<0.05,有统计学差异。(9)坐骨神经Ca N蛋白表达:模型组、电针组、CO2激光灸组大鼠坐骨神经Ca N蛋白表达与空白对照组比较;电针组与CO2激光灸组比较,均P>0.05,无统计学意义。电针组、CO2激光灸组与模型组比较,P<0.05,有统计学差异。(10)坐骨神经HO-1蛋白表达:模型组、电针组大鼠坐骨神经HO-1蛋白表达与空白对照组比较;电针组与模型组比较,均P>0.05,无统计学意义。CO2激光灸组与空白对照组、电针组、模型组比较,均P<0.05,有统计学差异。(11)背根神经节NGF蛋白表达:模型组、电针组、CO2激光灸组大鼠背根神经节NGF蛋白表达与空白对照组比较;电针组与CO2激光灸组比较,均P>0.05,无统计学意义。电针组、CO2激光灸组与模型组比较,P<0.01或P<0.05,有统计学差异。(12)背根神经节Ca N蛋白表达:各组大鼠相比均P>0.05,无统计学意义。(13)背根神经节TRPA1蛋白表达:模型组、电针组大鼠背根神经节TRPA1蛋白表达与空白对照组比较,均P<0.05,有统计学差异。CO2激光灸组与空白对照组、电针组比较;电针组、CO2激光灸组与模型组比较,均P>0.05,无统计学意义。【结论】(1)电针和CO2激光灸均可以缓解奥沙利铂所致大鼠神经病理性疼痛、增加皮肤血流灌注量,对OIPN具有一定的保护作用的。(2)电针和CO2激光灸可能通过保护神经与神经节中的NGF、Ca N、HO-1蛋白,增加外周血中ET、VEGF的含量来减缓奥沙利铂诱导的周围神经病变。
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