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生物除草剂符合当代社会的农药发展要求,利用微生物或其代谢产物开发除草剂是研发生物除草剂的重要途径。本试验从发病毛竹叶片上分离得到一株具有高除草活性的真菌菌株,并对其除草活性物质进行了研究,结果如下:①通过致病性分析,发现分离的真菌可以再次侵染毛竹,而且发病症状与分离时相同,证明该真菌是毛竹的致病菌。利用该菌株进行液体培养,提取粗毒素,并通过生物测定发现该菌的粗毒素具有很强的除草活性。②通过菌落特征、分生孢子形态及萌发部位等形态学特征和云南农业大学张忠义教授的鉴定,确定该菌为拟盘多毛孢属真菌。然后提取了该菌的DNA,采用通用引物ITS1和ITS4进行扩增,获得550 bp的片段,并提交到GenBank,获得登陆号EU279435。将该菌株的ITS序列在网上进行同源性比较,发现该菌的ITS与拟盘多毛孢属真菌的ITS高度相似,均达到95%以上,其中与Pestalotiopsis microspora的同源性达到100%,最终确定该菌为小孢拟盘多毛孢(P.microspora)。③通过对瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)的AP1菌株、灰葡萄孢(Botrytiscinerea Pers.)的BC4菌株和小孢拟盘多毛孢(P.microspora)的PM1菌株进行生物测定,发现以小孢拟盘多毛孢的PM1除草活性最佳,最后选定该菌株为供试菌株。④通过对小孢拟盘多毛孢粗毒素的萃取溶剂和流程进行摸索,发现利用乙酸乙酯直接萃取提取的粗毒素除草活性最好。经过对该菌株的发酵条件进行优化,明确了该菌株在加入硫酸亚铁的PD培养基中,15℃或30℃黑暗条件下,静置培养15d,得到的除草活性物质最多。⑤利用该菌株的粗毒素进行了除草谱和作物安全性试验,结果表明其除草活性强,除草谱广,对玉米、棉花和青椒很安全,但对大豆、黄瓜、西红柿等作物有一定影响。利用树脂柱、TLC方法对粗毒素进行分离纯化,得到一个高除草活性的组分6;然后再利用HPLC方法对组分6进行分离纯化,得到了一个纯度很高的单一除草活性组分Ⅲ。⑥对该菌的粗毒素进行了剂型的初步探索,制作了粗毒素的水剂。通过对该粗毒素水剂的室温、-20℃和54℃贮藏的稳定性分析,发现20%、30%、35%、40%、50%的小孢拟盘多毛孢粗毒素水剂可以稳定保存,生测后发现35%小孢拟盘多毛孢粗毒素水剂除草活性最好。再经过热贮后除草活性分析,结果表明35%小孢拟盘多毛孢粗毒素水剂具有很好的热贮稳定性。