论文部分内容阅读
心血管疾病发病率高,死亡率高,预后较差,易复发,是全球人类死亡的主要原因。前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)可使肝细胞对低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)颗粒清除能力下降,血浆LDL-C水平升高,导致动脉粥样硬化的发生和发展,促进心脑血管事件的发生。PCSK9是继他汀类药物之后最具前景的降脂药靶点,PCSK9的检测对于心血管疾病治疗及新药筛选具有重要意义。纳米传感技术为PCSK9的灵敏检测提供了可能,并为心血管疾病的治疗与药物作用评价提供了新的技术策略。本实验合成的氮掺杂石墨烯纳米带(N-GNRs)是一种新型碳纳米材料,不仅具有快速的电子转移性能和高导热性,而且还能催化过氧化氢(H2O2)。氨基功能化富勒烯(n-C60)是一种有前景的纳米材料,具有比表面积大,生物相容性好,亲水性好,表面含有丰富的氨基可以用于进一步修饰等优点。钯铂合金(PdPt)纳米粒子可以催化H2O2还原,改善生物相容性并促进电子转移。鉴于n-C60和PdPt的特点,本实验以n-C60作为载体,将PdPt纳米粒子固定在n-C60表面,得到氨基功能化富勒烯钯铂合金(n-C60-PdPt)纳米复合材料。n-C60-PdPt不但可以固载生物分子,而且能够催化H2O2产生电化学信号。N-GNRs和n-C60-PdPt组合不仅可以提高电子传递效率,而且能协同催化H2O2。为了验证材料的性能,本实验将N-GNRs和n-C60-PdPt用于构建无标记型免疫传感器,利用抗原抗体免疫反应实现血清中PCSK9快速检测。此外,本实验首次采用一步法合成了具有均匀形态和良好导电性的铂聚亚甲蓝(Pt-PMB)纳米复合材料,其具有氧化还原性,可以作为新型信号标签,产生电化学信号。基于此本实验将Pt-PMB和抗体结合形成生物结合物,作为识别元件,与N-GNRs和n-C60-PdPt用于构建夹心型免疫传感器,利用抗原抗体免疫反应实现血清中PCSK9超灵敏检测。在最佳实验条件下,无标记型免疫传感器的线性范围为10 pg.mL-1100 ng.mL-1,检测限为3.33 pg.mL-1(S/N=3),夹心型免疫传感器线性范围为100 fg.mL-1100 ng.mL-1,检测限为33 fg.mL-1(S/N=3),本检测策略为心血管疾病的治疗和降脂药物的筛选与评价提供良好的技术平台。