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目的通过在人群研究中分析抗结核药物性肝损伤(anti-tuberculosis drug-induced liver injury,ADLI)患者和非患者抗凝血标本中GRP78的表达水平及其与肝功指标ALT、AST的相关性,并在细胞中予以验证,探讨ADLI中组蛋白乙酰化对内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的调控作用。方法本课题从人群和细胞两个方面进行研究。1人群研究:对2016年7月至2016年12月在唐山市第四医院被诊断为结核病的住院患者的基本情况和抗凝血标本进行收集。将符合条件的63例患者纳入肝损伤组,在非肝损伤患者中进行成组匹配,选择与肝损伤组相匹配的63名患者作为非肝损伤组。ELISA法检测患者血浆中GRP78表达水平。利用两独立样本t检验进行分析,比较肝损伤组和非肝损伤组患者GRP78表达差异,并采用Pearson相关进行GRP78与ALT、AST的相关性分析。2细胞学实验:首先将抗结核药物分为五个加药组,即INH组、RFP组、PZA组、两药组和三药组,CCK8法确定最佳浓度后通过细胞形态学及肝功指标水平确定肝损伤造模成功;其次,利用CCK8法检测不同浓度的C646和MS-275对HL-7702肝细胞的毒性作用,确定两者的最佳浓度;最后,将每个加药组又分为对照组、药物组、C646组、药物+C646组、MS-275组、药物+MS-275组,内质网红色荧光探针标记后观察各药物组细胞的内质网状态,RT-PCR法检测各药物组细胞中P300、HDAC1、GRP78、CHOP的m RNA相对表达量,Western Blot方法检测各药物组细胞中P300、HDAC1、GRP78、CHOP的蛋白含量;微孔板法检测各药物组细胞培养上清液中ALT、AST的表达水平;Annexin V/PI双染法检测各药物组细胞凋亡率水平。结果本研究结果分为两部分。1人群研究结果:与非肝损伤组相比,肝损伤组血浆中GRP78表达明显升高(P<0.05),且GRP78与ALT、AST均呈明显正相关(r=0.468,0.386,均P<0.05)。2细胞学实验结果:与对照组相比,各药物组中内质网红色荧光均明显减弱,胞浆浓缩,HDAC1、GRP78、CHOP m RNA和蛋白表达量均显著上调(P<0.05),P300 m RNA和蛋白含量均明显降低(P<0.05),细胞培养上清液中ALT、AST表达水平明显升高(P<0.05)且细胞凋亡率上升明显(P<0.05);与药物组相比,各药物+C646组细胞中内质网荧光强度变化不明显,HDAC1变化亦不明显,P300、GRP78 m RNA和蛋白含量则明显降低(P<0.05),但CHOP表达量显著升高(P<0.05),细胞培养上清液中ALT、AST水平及细胞凋亡率再次升高(P<0.05);但各药物+MS-275组HDAC1、CHOP m RNA和蛋白水平明显降低(P<0.05),GRP78表达显著升高(P<0.05),但P300变化不明显,内质网荧光强度减弱更加明显,细胞培养上清液中ALT、AST水平及细胞凋亡率有所降低(P<0.05)。结论1 ADLI患者血浆中GRP78表达明显上调,且GRP78含量与ALT、AST呈正相关,在人群中初步证实ERS与ADLI有关。2在细胞中验证ADLI进程中伴随组蛋白乙酰化状态的改变和ERS的发生,且进一步证实组蛋白乙酰化水平的改变参与调控ERS,进而影响肝细胞损伤及凋亡。