前言 胃原发恶性淋巴瘤是发病仅次于胃癌的胃恶性肿瘤，近年国内发病有逐年增高的趋势，因而引起广大学者的重视。PTEN基因是继P53基因后发现的一种与多种肿瘤发生、发展关系密切的新肿瘤抑制基因，其编码产物具有磷酸酶活性，参与细胞骨架蛋白重组及由此引发的细胞信号转导和增殖、凋亡调节，因此在细胞恶变过程中起重要作用。目前，普遍认为PTEN的抑癌机制由如下途径协同完成：通过催化FAK的去磷酸化抑制细胞浸润及转移；通过抑制MAPK细胞信号传导途径抑制细胞生长分化；通过催化PIP₃去磷酸化阻止细胞生长，并活化Caspase家族而促进细胞凋亡。 Caspase家族是直接导致凋亡细胞解体的蛋白酶系统，在细胞凋亡机制网络中居中心地位。其中，Caspase-3是哺乳动物细胞凋亡的关键蛋白酶，其介导的细胞凋亡在肿瘤的发生发展中起重要作用。Karajewaka等首次采用免疫组化方法检测Caspase-3（CPP32）在人体各组织器官内的表达分布，发现它在体内分布广泛（主要存在于细胞浆中，但淋巴结生发中心的B细胞、胃小凹上部隐窝细胞和结肠上皮细胞等细胞核内也有阳性表达），提示该蛋白对人体绝大部分细胞的生存和死亡有调节作用。 本研究观察PTEN基因编码产物和Caspase-3在胃原发恶性淋巴瘤（包括MALT淋巴瘤）组织中的表达水平及其与浸润、转移的关系，旨在探讨PTEN基因和Caspase-3在胃原发恶性淋巴瘤发生、发展过程中的作用和相关的分子病理学机制。 实验材料 收集中国医科大学附属第一医院和辽宁省肿瘤医院u9o年一2000年期间胃原发恶性淋巴瘤标本56例，其中男28例，女28例，年龄 ZI－76岁，平均年龄 53．1岁。肿瘤浸润深度达浆膜下和穿透浆膜者29例，伴淋巴结转移者32例。每例用0取原发灶、转移灶肿瘤组织和远离肿瘤的非瘤“正常”胃粘膜组织，标本均经10％福尔马林固定，常规石蜡包埋，4pm厚连续切片。每例均由两名高年资病理医师做病理学诊断。 实验方法 本实验采用 SABC免疫组化方法，SABC试剂盒购自博士德生物工程有做司。兔抗人Iyrl7N多克隆抗体馆用型)购自迈新生物技术有限公司，兔抗人 Caspase－3多克隆抗体（工作浓度地200）购自DAKO公司。SABC免疫组化染色严格按照操作规范进行，设置阳性和阴性对照以保证染色结果的可靠性。 阳性定性标准：细胞浆中见清晰棕褐色颗粒者为阳性细胞。特异性免疫反应强度分级标准：阳性细胞＜5％为阴性(－＊阳性细胞5－25％为弱阳性(十太阳性细胞25％－50％为中度阳性(＋＋＊阳性细胞＞50％为强阳性（－一人 结 果 56例胃原发恶性淋巴瘤中28例见PYIi：N基因编码产物表达， ·2· 阳性率为50．0％阻8／56入较非瘤胃粘膜表达万6．4％，27／28）明 显下降(P＜o．o人且阳性病例均有不同程度的表达水平降低。 PI？Ii：N基因编码产物的表达与胃原发恶性淋巴瘤在胃壁内的浸润 深度和淋巴结转移密切相关河＜o．防人浸润深度达浆膜下及穿 监膜者mN的表达明显低于浸润达粘膜及肌层者O＜o．N人 ＿有淋巴转移者N的表达明显低于无淋巴转移者(P＜o．洒人。Caspase－3在原发胃恶性淋巴瘤组织中阳性率 76．8啪(43／ 56＊显著低于浅层胃粘膜中的表达部6．4％(对月8八P＜O．05入 PI？liN基因编码蛋白表达与CasPase－3的表达呈正相关（P＜ 0．05）。 讨 论 WTIi：N／MMACI／TEPI是至今为止发现的第一个具有磷酸酶 活性的抑癌基因。其编码产物在锚着点与肌力蛋白结合，进而参 与细胞的生长调节、肿瘤细胞浸润和转移以及血管发生等生物学 过程。本研究结果显示56例胃原发恶性淋巴瘤中50．0％表达 ／W？IIN基因编码产物，低于非瘤胃粘膜的阳性表达率O6．4％，27／ 28＊P＜o．05厂与文献报道结果相一致。目前，研究发现PYE N 在恶性肿瘤中存在突变、LOH和过甲基化等遗传学改变，这些改 变构成PI！liN表达下降的分子生物学基础，而PITh：N可以抑制细 胞生长分化并促进细胞凋亡。WTI｛N表达下降，正常细胞的分化 和凋亡将发生紊乱，结果导致肿瘤发生。因此，WTI：N因发生了突 变等遗传学改变而导致的表达下调参与胃原发恶性淋巴瘤的发生 过程。 此外，本研究结果显示浸润深度达浆膜下及穿透浆膜者 N的表达明显低于浸润达粘膜及肌层者(P＜o．05＊有淋巴转 ·3·移者地N的表达明显低于无淋巴转移者瞩＜o．肪X说明PYEN表达下调参与胃原发恶性淋巴瘤的浸润和转移等演进过程。有学者研究发现N阳N可以通过FAK的去磷酸化抑制细胞生长、浸润和转移，un。g等研究发现nlTlix通?