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目的:
通过研究临床常用的四类正畸托槽釉质粘结材料及其组分的细胞毒性,比较相关材料的细胞毒性大小,寻找造成釉质粘结剂细胞毒性的根源,为正畸粘结材料的进一步开发、应用提供理论基础和科学依据,并指导正畸医师正确使用正畸釉质粘结剂。
材料和方法:
选用四种正畸托槽釉质粘结材料:化学固化釉质粘结剂 Consice(3M,St. Paul,MN),光固化釉质粘结剂 Transbond XT(3M,Unitek,St. Paul,MN),复合树脂玻璃离子釉质粘结剂Fuji Ortho LC(GC Corp;Tokyo,Japan),自酸蚀粘结剂Transbond plus self etching primer(3M),用细胞培养液分别浸提各材料及其组分24 hours,配置三种浓度的浸提液(0.1、1、10 mg/ml),将小鼠成纤维细胞(L-929)在三种浓度的各类材料浸提液中培养 24 hours,台盼蓝原位染色后置于倒置相差显微镜下观察各实验组中L-929细胞形态学的变化,并通过 Alamar Blue 比色法检测各类材料及其组分对细胞相对增值率的影响,对实验结果进行单因素方差分析和Turkey’s多重比较,评价其细胞毒性。
结果:
台盼蓝原位染色后发现0.1mg/ml浓度的各样本和1mg/ml浓度Transbond XT糊剂(paste)和糊剂+底胶(paste+primer)等检测项样本死细胞数量很少,活细胞已基本融合生长为单层,且形态没有太大的变化,均呈典型的纺锤状;1mg/ml浓度Fuji Ortho LC液剂(liquid)等样本出现不同程度的细胞死亡现象,死亡细胞数量增加,活细胞数量减少;10mg/ml 浓度Fuji Ortho LC液剂(liquid)等样本出现明显的细胞死亡现象,死亡细胞数量明显增加。
Concise七个检测项各浓度浸提液组的细胞相对增值率具有较大的差异,其中树脂A(Resin A)和树脂B(Resin B)的细胞毒性呈现明显的剂量依赖关系,细胞相对增值率随浸提液浓度的增高而呈现出明显的下降趋势,10mg/ml浓度组的细胞毒性最高,其相对增值率分别为10.84±2.16[%]和12.53±3.16[%],与其余两组间的差异均具有显著性意义(P<0.05)。
Fuji Ortho LC液体成分(liquid)中的细胞相对增值率随浸提液浓度的增高而呈现出明显的下降趋势,其中10mg/ml浓度组的细胞相对增值率最低,为27.67±5.14[%],与其余两组的差异具有显著性意义(P<0.05);而在粉剂(powder)及粉剂+液剂(powder+liquid)各浓度浸提液中的细胞相对增值率无明显改变,各组间无统计学差异(P>0.05)。
Transbond XT和Transbond plus self etching primer各自的底胶(primer)及糊剂+底胶(paste+primer)检测项的细胞毒性也呈现明显的剂量依赖关系,其中10mg/ml浓度组的细胞相对增值率最低,分别为18.75±2.29[%]和23.15±5.76[%]、22.34±3.12[%]和28.54±4.25[%],与其余两组间的差异均具有显著性意义(P<0.05)。
结论:
1.Alamar Blue法用于牙科材料的细胞毒性评价具有方便、有效的特点。
2.釉质粘结剂都存在细胞毒性,复合树脂玻璃离子粘结剂的液体组分、化学固化粘结剂的树脂组分及光固化粘结剂、自酸蚀粘结剂的底胶组分具有较大的细胞毒性。
3.临床使用各类粘结剂时,必须去除多余的粘结材料,注意采取各种措施保护口腔软组织,尽量避免其接触釉质粘结剂,并使用水冲洗患者的口腔。