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目的探讨CML/CD36抑制泡沫细胞迁移加速动脉粥样硬化演进的作用机制。方法(1)体内实验apo E-/-小鼠6周龄时予腹腔注射链脲佐菌素40 mg/kg/day,连续5天。2周后将血糖水平≥300mg/d L的小鼠纳入本研究,分组如下:对照组(普食,n=8)、模型组(高脂饮食,n=8)、CML组(高脂饮食+尾静脉注射CML10mg/kg/day,n=8)、anti-CD36组(高脂饮食+尾静脉注射CML 10mg/kg/day+尾静脉注射anti-CD36 100μg/week,n=8)。连续饲喂4个月后将小鼠行安乐死,进行血清学检测(血脂血糖,血清CML水平),形态学检测(HE染色、油红O染色、免疫组化染色及免疫荧光染色)及分子生物学检测。(2)体外实验采用RAW264.7巨噬细胞与40μg/m L ox-LDL共孵育24h制备泡沫细胞模型,在泡沫细胞基础上进行如下研究:首先观察CML对泡沫细胞脂质蓄积和CD36表达的影响及CML与CD36的相互结合情况;其次观察CML对泡沫细胞迁移和肌动蛋白聚合的影响;继之探讨CD36在CML抑制泡沫细胞迁移中的作用;最后探讨CML/CD36影响泡沫细胞迁移的相关机制。相关研究方法包括:油红O染色、胆固醇氧化酶法、Transwell迁移实验和划痕实验、免疫共沉淀、免疫荧光染色、活性氧DCF检测法、Western blot及q RT-PCR检测等。结果(1)HE染色提示CML组apo E-/-小鼠主动脉粥样斑块面积明显增加,胆固醇结晶聚集在纤维帽之下,而相对CML组,anti-CD36组小鼠主动脉斑块的面积明显减小,胆固醇结晶也减少。(2)油红O染色和胆固醇含量检测发现CML组主动脉粥样斑块可见大量脂质蓄积,总胆固醇含量明显增加;相对于CML组,anti-CD36组的脂质蓄积和总胆固醇含量减少,而在主动脉旁淋巴结内anti-CD36组脂质蓄积及胆固醇含量均增多。(3)免疫荧光检测和Western blot检测提示anti-CD36组主动脉粥样斑块CD68蛋白表达低于CML组,但主动脉旁淋巴结anti-CD36组CD68表达却显著高于CML组。(4)CML促进泡沫细胞脂质蓄积,上调泡沫细胞表面CD36表达,抑制泡沫细胞迁移,促进细胞肌动蛋白聚合。(5)CML通过与CD36互相结合抑制泡沫细胞迁移。(6)CML/CD36抑制泡沫细胞迁移与细胞游离胆固醇、活性氧、p-FAK、Arp2/3复合体以及F-actin的聚合有关。结论(1)CML/CD36抑制斑块中泡沫细胞外迁至血管旁淋巴结,加速apo E-/-小鼠动脉粥样硬化的演进。(2)CML/CD36可能通过细胞游离胆固醇、活性氧、p-FAK、Arp2/3复合体及F-actin聚合的介导而抑制泡沫细胞迁移。