背景子宫内膜异位症(以下简称内异症)是一种妇科常见病,常表现为慢性盆腔痛/痛经和不孕,其中疼痛是内异症的特征性临床症状,严重影响患者的生活质量,但其确切机制目前尚不清楚。内异症按病灶分布、临床表现、处理及预后的不同将其分为腹膜型、卵巢型及深部浸润型3种。虽然这三种类型均能引起不同类型及不同程度的临床疼痛症状,但深部浸润型相关疼痛最明显。因此,目前对深部浸润型相关疼痛的研究报道较多,而对腹膜病灶神经分布相关疼痛的研究目前较少。目前腹膜病灶相关疼痛的发生机制不清。最近Tokushige等研究发现,腹膜病灶中存在有介导疼痛P物质反应阳性的神经纤维分布,进一步分析发现,病灶中可有感觉转入Aδ和C神经纤维、胆碱能以及肾上腺素能神经纤维。由于腹膜病灶中的神经纤维分布不同于正常腹膜,且其密度显著高于正常腹膜,因此称其为内异症相关神经纤维。Mechsner等的最新研究发现,腹膜内异症相关神经纤维可表达GAP-43(一种促神经纤维再生因子),而正常腹膜中的神经纤维却不表达,提示,内异症腹膜病灶中的神经纤维为新生的神经纤维,可能参与内异症的发病。Mechsner等的最新研究还发现,内异症相关腹膜病灶神经纤维分布出现的阳性率与患者疼痛的严重程度有关。但神经纤维分布的密度与患者疼痛的严重程度无相关性。提示,内异症相关腹膜病灶神经纤维分布与患者的疼痛症状有关,但神经蛋白标志物的选择也是至关重要。PGP9.5是一种高度特异性的泛神经标志物,可检测有髓与无髓神经纤维(Aα、Aβ、Aγ、Aδ、B纤维、C纤维)。免疫组织化学证实,PGP9.5不仅可出现在中枢和周围神经系统所有神经元及神经纤维,还可出现在很多神经内分泌细胞以及卵巢黄体。基于以上的研究背景,我们设计了本实验,采用PGP9.5作为检测指标来检测内异症患者腹膜病灶神经纤维分布,旨在探讨内异症腹膜病灶神经纤维产生分布与患者临床疼痛症状以及发病的关系,为临床研究内异症疼痛发生机制提供实验室依据。材料和方法1.研究对象:选择2008年12月-2009年6月在在浙江大学附属妇产科医院住院手术并经病理证实的各期(rAFS分期,Ⅰ期=6,Ⅱ期=8,Ⅲ期=8,Ⅳ=10)内异症患者的腹膜病灶组织32例,其中伴疼痛与不伴疼痛各16例,对照组为同期在我院住院手术并经病理确诊为子宫肌瘤且不伴疼痛患者的正常腹膜组织。2.研究方法:2.1腹膜神经纤维分布的检测应用泛PGP9.5,使用免疫组化Envision二步法染色,检测32例内异症患者(伴与不伴疼痛各16例)的腹膜病灶组织和20例对照组腹膜组织中神经纤维的分布。2.2术前疼痛评分及疼痛类型的判定采用视觉模拟(VAS)评分方法给内异症组患者进行术前疼痛评分。VAS评分标准是从无疼痛到剧烈疼痛分为10级,无痛为0分,剧烈疼痛为10分。采用统一的VAS评分卡由一个专业已培训人员与患者交谈,由患者指明疼痛的严重程度及疼痛的类型。如患者在经期盆腔疼痛定为痛经,如盆腔持续性疼痛,并达6个月以上,则定为慢性盆腔疼痛。3.统计方法:计量资料选用Kruskal-Wallis H、Mann-Whitney U检验和Spearman检验分析,数据以中位数及范围表示。计数资料应用卡方检验及Fisher精确概率法。实验数据经SPSS 15.0统计软件处理,P＜0.05表示具有统计学意义。结果1,内异症腹膜病灶组织和对照组腹膜组织均能检测到PGP9.5免疫反应阳性的神经纤维,且这些神经纤维均分布在子宫内膜间质中,但内异症伴疼痛组腹膜病灶神经纤维阳性率和神经纤维分布密度均显著高于内异症不伴疼痛组和对照腹膜组,且内异症不伴疼痛组腹膜病灶与对照腹膜组之间比较均无显著性差异。2,内异症伴疼痛组腹膜病灶神经纤维分布密度与患者疼痛的的严重程度呈显著相关3,内异症伴痛经和/或慢性盆腔痛患者腹膜病灶神经分布密度显著高于伴其他疼痛类型者,但与病灶活性、病灶部位及疾病分期均无关。结论内异症腹膜病灶出现与患者疼痛相关的PGP9.5免疫反应神经纤维分布可能参与内异症疼痛的发病机制。