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目的:观察中药单体雷公藤内酯酮(Triptonide,TN)体内、外抗胶质瘤细胞的作用,解析TN抗胶质瘤细胞的作用机制。方法:1)四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、台盼蓝(Trypan blue)染色法、细胞集落试验(Clonogenicity assay)检测TN处理不同作用时间后,对胶质瘤细胞存活、死亡及细胞增殖的影响;2)Histone DNA ELISA法、Caspase-3试剂盒方法、Annexin V-碘化丙啶(PI)流式细胞仪法检测TN对胶质瘤细胞凋亡的作用;3)PI流式细胞仪法观察TN处理后胶质瘤细胞周期的变化;4)运用免疫印迹(Western blot)方法检测TN处理后胶质瘤细胞腺苷活化蛋白激酶(AMPK)等信号通路的活化水平;5)用药理学和shRNA等手段抑制胶质瘤细胞内AMPK的活性,观察抑制后TN体外抗胶质瘤细胞活性的变化;6)建立裸鼠荷瘤模型,观察TN在体抗胶质瘤细胞的活性。结果:1)纳摩尔(nM)级别中药单体雷公藤内酯酮(Triptonide,TN)即可显著抑制人胶质瘤细胞(U87MG、U251MG细胞)存活和增殖,诱导癌细胞死亡。而TN对正常小鼠星形胶质细胞无显著作用。2)多种实验方法证实,TN显著诱导胶质瘤细胞凋亡。TN还诱导胶质瘤细胞G2-M周期停滞。3)TN处理后胶质瘤细胞内AMPK活化水平显著上升,并伴随着多个生长因子受体(EGFR、PDGFR等)表达下调、下游PI3K-AKT-mTOR失活。4)shRNA等手段抑制AMPK部分逆转TN诱导的体外抗胶质瘤细胞的作用,并恢复细胞内EGFR、PDGFR的表达。5)在裸鼠荷瘤模型中,腹腔注射TN(5-20mg/kg体重)显著抑制U87MG移植瘤的在体生长。TN处理对裸鼠无显著毒性作用,裸鼠体重几乎无变化。6)分析U87MG移植瘤的组织发现,TN处理后,瘤组织内AMPK活化水平也显著上升。结论:nM级别TN显著抑制人胶质瘤细胞存活、增殖,并诱导胶质瘤细胞凋亡及细胞周期停滞;腹腔注射TN显著抑制U87MG移植瘤的在体生长。TN诱导的抗胶质瘤活性的作用可能和其活化AMPK并诱导EGFR、PDGFR等多个生长因子受体降解有关。