唐古特青兰黄酮提取、纯化工艺及其药效学研究

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唐古特青兰是藏区常用的藏药之一,从上世纪九十年代开始有关于唐古特青兰成分及药理作用的研究报道,迄今还没有质量标准,为扩大此优质丰富资源的利用范围,本文按照中国药典2010版的要求探究了唐古特青兰的质量标准,以便控制药材质量;唐古特青兰用药方式多为汤药,但其中主要起抑菌抗病毒作用的是黄酮类,传统用药方式影响了有效利用,因此要对粗提物提取纯化并进行系统研究;进一步对纯化黄酮进行了药效学研究和制剂学研究,为日后深入研究和生产应用提供参考和依据。1、参照中国药典相关规定对唐古特青兰进行了水分、灰分、浸出物的测定;2、建立了以检测藏药唐古特青兰中木犀草苷为指标成分的HPLC含量测定法,并通过方法学验证表明该方法稳定可靠。3、通过相关文献查阅并结合生产实际确定影响黄酮提取率的影响因素,通过正交试验法优选出了唐古特青兰总黄酮最佳提取工艺。4、通过静态吸附率与解吸附率实验选取适宜纯化黄酮的D101大孔吸附树脂,再通过考察其动力学曲线、不同浓度洗脱液洗脱效果以及不同上样浓度吸附曲线等实验得出最佳的纯化工艺。5、考察唐古特青兰水提物、醇提物、纯化黄酮以及金银花颗粒的抑菌效果,结果显示唐古特青兰纯化黄酮对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑菌效果优于其水提物和醇提物,并且优于金银花颗粒。6、通过体外抗病毒实验可知纯化总黄酮对HSV-2病毒所致细胞病变、直接杀伤和对病毒感染预防均未见明显效果。7、对唐古特青兰纯化黄酮进行了制剂学研究,确定了胶囊内容物中主药与各辅料的配比,确定了 HCl-Mg反应和薄层色谱两种鉴别方法,建立了主药含量测定的方法,并对胶囊的外观、溶化性、水分和装量差异进行检查,均可达到药典标准。
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