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目的
观察逆灸对亚健康模型大鼠血清CORT、ACTH、CRH及CRHmRNA表达的影响,探讨逆灸可能通过HPA轴乃至神经-内分泌-免疫网络预防亚健康状态的机制。
方法
1.分组及造模:通过旷场实验筛查出健康清洁级SD大鼠30只,按随机数字表法分为空白对照组(10只)、模型对照组(10只)和逆灸组(10只),空白对照组不做任何治疗,每日一次模拟抓拿固定;模型对照组不做任何治疗,每日一次模拟抓拿固定,至第24天开始采用束缚应激结合游泳运动制备模型,每日一次,共21天;逆灸组第1天开始艾灸双侧“足三里”“肾俞”穴,7天为一个疗程,持续3个疗程共21天,疗程中间隔1天。将大鼠固定于自制鼠板上,腧穴处剪毛,将艾条固定于自制艾灸支架上,垂直距离大鼠穴位2-3cm施灸,每日一次,每次20min。至第24天开始采用束缚应激结合游泳运动制备模型,每日一次,共21次。
2.指标检测:观察大鼠一般情况,记录大鼠悬尾不动时间、大鼠跑台至力竭时间。应用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定血清中CORT、ACTH、CRH的含量,取下丘脑,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法测定CRHmRNA表达的影响。
结果
1.大鼠一般情况
空白组大鼠精神状态良好,体毛规整光泽,反应灵敏,精力充沛,活动正常,饮食、饮水正常;模型组大鼠精神状态较疲惫,易蜷缩,体毛杂乱,暗淡竖起、色泽萎黄不规整,触之挣扎躲避,活动量减少,饮食、饮水减少;逆灸组大鼠精神状态较好,体毛杂乱暗淡,反应较灵敏,饮食、饮水正常,活动正常,精力充沛,提示逆灸对亚健康模型大鼠改善较为明显。
2.大鼠运动至力竭时间23d、45d表达
23d:逆灸组、模型组、空白组三组之间对比均无显著性差异,(P>0.05)。45d:与模型组相比,空白组和逆灸组大鼠运动至力竭时间显著延长(P<0.01),与空白组相比,逆灸组大鼠运动至力竭时间显著延长(P<0.01)。
3.大鼠悬尾行为23d、45d表达
23d:逆灸组、模型组、空白组三组之间对比均无显著性差异,(P>0.05)。45d:与空白组相比,模型组和逆灸组大鼠悬尾不动时间显著延长(P<0.01),与模型组相比,逆灸组大鼠悬尾不动时间显著缩短(P<0.01)。
4.逆灸对亚健康模型大鼠血清中CORT的影响
与空白对照组比较,模型组大鼠CORT含量显著增高(P<0.01);与模型对照组比较,逆灸组大鼠CORT含量显著增高(P<0.01),逆灸组CORT含量和空白组无显著性差异(P>0.05)。
5.逆灸对亚健康模型大鼠血清中ACTH的影响
与空白对照组比较,模型组大鼠ACTH含量显著增高(P<0.01);与模型对照组比较,逆灸组大鼠ACTH含量显著增高(P<0.01)。
6.逆灸对亚健康模型大鼠血清中CRH的影响
与空白对照组比较,模型组大鼠CRH含量显著增高(P<0.01);与模型对照组比较,逆灸组大鼠CRH含量显著增高(P<0.01)。
7.逆灸对亚健康模型大鼠下丘脑中CRHmRNA表达的影响
与空白对照组比较,模型组大鼠CRHmRNA含量明显升高(P<0.01);与模型对照组比较,逆灸组大鼠CRHmRNA含量显著降低(P<0.01)。
结论
(1)逆灸可以延长大鼠力竭跑台时间,减少大鼠悬尾不动时间,缓解大鼠疲劳和不良情绪,
(2)逆灸可以下调亚健康模型大鼠血清中CORT、CRH、ACTH的含量,能下调下丘脑中CRHmRNA的表达;
(3)本研究表明逆灸作为一种防治亚健康状态的有效手段,可能通过下调HPA轴相关激素水平来调节亚健康状态,这可能是逆灸防治亚健康状态的机制之一。
观察逆灸对亚健康模型大鼠血清CORT、ACTH、CRH及CRHmRNA表达的影响,探讨逆灸可能通过HPA轴乃至神经-内分泌-免疫网络预防亚健康状态的机制。
方法
1.分组及造模:通过旷场实验筛查出健康清洁级SD大鼠30只,按随机数字表法分为空白对照组(10只)、模型对照组(10只)和逆灸组(10只),空白对照组不做任何治疗,每日一次模拟抓拿固定;模型对照组不做任何治疗,每日一次模拟抓拿固定,至第24天开始采用束缚应激结合游泳运动制备模型,每日一次,共21天;逆灸组第1天开始艾灸双侧“足三里”“肾俞”穴,7天为一个疗程,持续3个疗程共21天,疗程中间隔1天。将大鼠固定于自制鼠板上,腧穴处剪毛,将艾条固定于自制艾灸支架上,垂直距离大鼠穴位2-3cm施灸,每日一次,每次20min。至第24天开始采用束缚应激结合游泳运动制备模型,每日一次,共21次。
2.指标检测:观察大鼠一般情况,记录大鼠悬尾不动时间、大鼠跑台至力竭时间。应用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定血清中CORT、ACTH、CRH的含量,取下丘脑,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法测定CRHmRNA表达的影响。
结果
1.大鼠一般情况
空白组大鼠精神状态良好,体毛规整光泽,反应灵敏,精力充沛,活动正常,饮食、饮水正常;模型组大鼠精神状态较疲惫,易蜷缩,体毛杂乱,暗淡竖起、色泽萎黄不规整,触之挣扎躲避,活动量减少,饮食、饮水减少;逆灸组大鼠精神状态较好,体毛杂乱暗淡,反应较灵敏,饮食、饮水正常,活动正常,精力充沛,提示逆灸对亚健康模型大鼠改善较为明显。
2.大鼠运动至力竭时间23d、45d表达
23d:逆灸组、模型组、空白组三组之间对比均无显著性差异,(P>0.05)。45d:与模型组相比,空白组和逆灸组大鼠运动至力竭时间显著延长(P<0.01),与空白组相比,逆灸组大鼠运动至力竭时间显著延长(P<0.01)。
3.大鼠悬尾行为23d、45d表达
23d:逆灸组、模型组、空白组三组之间对比均无显著性差异,(P>0.05)。45d:与空白组相比,模型组和逆灸组大鼠悬尾不动时间显著延长(P<0.01),与模型组相比,逆灸组大鼠悬尾不动时间显著缩短(P<0.01)。
4.逆灸对亚健康模型大鼠血清中CORT的影响
与空白对照组比较,模型组大鼠CORT含量显著增高(P<0.01);与模型对照组比较,逆灸组大鼠CORT含量显著增高(P<0.01),逆灸组CORT含量和空白组无显著性差异(P>0.05)。
5.逆灸对亚健康模型大鼠血清中ACTH的影响
与空白对照组比较,模型组大鼠ACTH含量显著增高(P<0.01);与模型对照组比较,逆灸组大鼠ACTH含量显著增高(P<0.01)。
6.逆灸对亚健康模型大鼠血清中CRH的影响
与空白对照组比较,模型组大鼠CRH含量显著增高(P<0.01);与模型对照组比较,逆灸组大鼠CRH含量显著增高(P<0.01)。
7.逆灸对亚健康模型大鼠下丘脑中CRHmRNA表达的影响
与空白对照组比较,模型组大鼠CRHmRNA含量明显升高(P<0.01);与模型对照组比较,逆灸组大鼠CRHmRNA含量显著降低(P<0.01)。
结论
(1)逆灸可以延长大鼠力竭跑台时间,减少大鼠悬尾不动时间,缓解大鼠疲劳和不良情绪,
(2)逆灸可以下调亚健康模型大鼠血清中CORT、CRH、ACTH的含量,能下调下丘脑中CRHmRNA的表达;
(3)本研究表明逆灸作为一种防治亚健康状态的有效手段,可能通过下调HPA轴相关激素水平来调节亚健康状态,这可能是逆灸防治亚健康状态的机制之一。