目的:本文通过冷冻环冷冻促排周期未成熟卵母细胞复苏后成活率(%)和体外成熟(IVM)能力的比较,及卵母细胞免疫染色后纺锤体和染色体形态的分析,来探索未成熟卵母细胞适宜的冷冻方法。方法:获得的GV期卵母细胞随机分为三个组:(1)对照组:GV期卵母细胞直接体外成熟为MII期卵母细胞(n=68);(2)GV期冷冻组:卵母细胞在GV期冷冻后体外成熟MII其卵母细胞(n=111);(3)MII期冷冻组:GV期卵母细胞IVM为MII期并予以冷冻(n=69)。观察它们复苏后成活率(%)和体外成熟(IVM)能力,三组中获得MII期的卵母细胞最后均予以免疫荧光染色,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察纺锤体和染色体的形态。结果:GV期冷冻组卵母细胞存活率显著性高于MII期冷冻组卵母细胞,而GV期冷冻组卵母细胞的体外成熟率和对照组没有明显的差异。GV期冷冻组成熟后卵母细胞正常形态的纺锤体(14.1%)和染色体(12.5%)都显著性低于对照组(29.1%,32.7%),MII期冷冻组正常形态的纺锤体(11.4%)显著性低于对照组,染色体(15.9%)也低于对照组,但是没有显著性意义。结论:冷冻坏玻璃化冷冻对促排周期中未成熟卵母细胞无论在GV期还是MII期都会对纺锤体和染色体都会带来一定的损伤。IVM技术和玻璃化冷冻技术还需要进一步的提高。