异叶败酱化学成分及其抗肿瘤活性的研究

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本论文在体外细胞毒性检测SRB法的指导下对异叶败酱甲醇提取物的石油醚,氯仿,乙酸乙酯和正丁醇萃取物分别进行了抗肿瘤活性成分的跟踪分离筛选。实验结果表明,氯仿萃取物对人肝癌细胞株HepG2、人胃腺癌细胞株SGC-7901和人早幼粒白血病细胞株HL-60的细胞毒性最强,IC50分别为:19.57±2.54μg/mL,44.04±5.04μg/mL和17.91±0.88μg/mL;且石油醚,氯仿,乙酸乙酯和正丁醇4种萃取物对人早幼粒白血病细胞株HL-60的细胞毒性作用最明显,IC50分别为:33.72±5.8μg/mL,17.91±0.88μg/mL,31.49±3.70μg/mL和40.23±7.39μg╱mL。可见氯仿萃取物对人早幼粒白血病细胞株HL-60细胞毒性最强。以细胞毒性最强的氯仿萃取物为进一步研究对象,通过硅胶柱层析法共分离得到18个单体化合物。运用现代波谱学方法(NMR、MS、IR、UV)鉴定出11个化合物,化合物1~11分别为:软木三萜酮,β-谷甾醇,齐墩果酸,熊果酸,常春藤皂苷元,胡萝卜苷,海棠果醇,7-羟基-6-甲氧基香豆素,齐墩果酸-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷,β-香树精和α-香树精;其中7个为三萜化合物,2个为甾体化合物,三萜皂苷和香豆素类化合物各1个。除齐墩果酸外,其余化合物都是首次从该植物中分离得到,其中软木三萜酮、海棠果醇、β-香树精和α-香树精4个化合物为首次从该属植物中分离得到。利用SRB法对得率较高的化合物进行了细胞毒性检测,结果表明齐墩果酸,熊果酸,常春藤皂苷元,7-羟基-6-甲氧基香豆素和齐墩果酸-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷对人肝癌细胞株HepG2、人胃腺癌细胞株SGC-7901和人早幼粒白血病细胞株HL-60都有很强的细胞毒性,IC50在4.56±0.48μg/mL~18.07±0.05μg/mL之间。同时也发现所分离到的三萜化合物C-28位的羧基(—COOH)是其细胞毒性作用的活性基团。进一步对三萜化合物常春藤皂苷元的体外抗肿瘤机制进行了初步研究,通过倒置显微镜观察和台盼蓝排染法,发现常春藤皂苷元能明显抑制人早幼粒白血病细胞株HL-60生长;并通过Hoechst33258荧光染色和DNA ladder电泳对其致死机理进行研究,发现常春藤皂苷元能诱导人早幼粒白血病细胞株HL-60调亡。
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