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肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人类生命威胁最大的恶性肿瘤之一,严重危害人群健康。近年来,治疗肺癌的方法不断进步,然而肺癌仍是世界范围内肿瘤死亡的首要原因,主要原因之一是肺癌的早期诊断仍无突破性进展,而且尚无真正有效的治疗方法。因此,探究肺癌尤其是初始阶段的发病机制,对肺癌的诊断及治疗具有重要意义。CUL4B是Cullin蛋白家族的成员之一。Cullin蛋白是一种骨架蛋白,参与构成Cullin-Ring E3泛素连接酶(Cullin-Ring ubiquitin ligase complexs,CRLs),该复合物可特异性作用于多种底物蛋白,从而调控多种生命活动。CUL4B作为癌基因在多种肿瘤中发挥作用,但对于其在肿瘤初始阶段发挥的作用尚未得到阐明。因此,本文围绕CUL4B在肺癌发生中的作用及其对癌基因诱导细胞衰老的影响进行探究,主要进行了以下工作:1.构建乌拉坦诱导的小鼠肺癌模型。结果显示,小鼠腹腔注射乌拉坦2个月后其肺组织出现明显腺圈,4个月后可观察到肿瘤形成。随后我们在CUL4B肺部特异性敲除的小鼠中检测其肿瘤发生情况,结果显示相较于野生型小鼠其肺部肿瘤数目显著增多。以上结果提示CUL4B抑制乌拉坦诱导的小鼠肺癌发生。2.构建KRASG12D诱导的小鼠肺癌模型。我们将表达SPC-CRE、LSL-KRASG12D及CUL4Bf/f的三种转基 因 小 鼠杂 交,得到 SPC-CRE-KRASG12D 及SPC-CRE-CUL4Bf/f-KRASGG12D两种小鼠肺癌模型,探究CUL4B对小鼠肺部成瘤的影响。结果显示,CUL4B肺部特异性敲除小鼠的肿瘤数目多于对照,肿瘤发生更为显著。以上结果提示CUL4B抑制KRASG12D诱导的小鼠肺癌发生。3.CUL4B促进癌基因诱导的细胞衰老。首先我们构建了癌基因诱导的细胞衰老模型,使用Ad-myc感染细胞后,细胞内CUL4B表达水平上调。随后我们在CUL4B低表达及高表达的细胞系中检测细胞衰老,结果显示CUL4B低表达可抑制细胞衰老,高表达可促进细胞衰老,且CUL4B在该过程中发挥作用依赖于p53。通过以上研究我们得出结论:CUL4B可促进癌基因诱导的细胞衰老,并且抑制肺癌发生的初始阶段。本课题为进一步明确CUL4B的生物学功能奠定了基础,为肺癌的诊断和治疗提供了实验数据。