单克隆抗体,简称单抗,已被广泛应用于疾病诊断、治疗等领域。色谱法是目前单抗纯化过程中最常用的方法,但传统的柱色谱法存在操作时间长、操作压力高等问题,是单抗成本高、产率低的主要原因。膜色谱具有传质速率高、系统压降低、易于工程化放大的特点,可替代柱色谱应用于单抗纯化过程中。膜色谱介质是膜色谱的核心,由连接有特殊配体的膜构成。理想的膜色谱介质需具有良好的重复使用性,目前膜色谱介质基质膜多为再生纤维素类材质,物理化学稳定性差,难以重复使用;而机械强度高、稳定性良好的聚偏氟乙烯（PVDF）等疏水膜,呈化学惰性,无法直接与配体共价连接。为制备重复使用性良好的膜色谱介质,需采用具有高物理化学稳定性及高反应活性的基质膜,但现有的膜材质难以兼顾两者。对稳定性良好的膜进行处理,使其具有可连接配体的活性基团,成为制备理想膜色谱介质的最优选择。本课题通过对比各种膜处理方法,采用温和、具有广泛适用性的聚多巴胺沉积改性技术在膜上构筑反应活性层,制备了具有重复使用性的膜色谱介质并在单抗纯化过程中检测了膜色谱介质的性能。本文以聚乙烯亚胺为配体构建了阴离子交换膜色谱介质,并以牛血清蛋白为模型杂蛋白模拟单抗纯化过程,考察了四种膜处理方法对膜色谱介质性能的影响,包括配体吸附处理、碱处理、氧化处理及基质膜改性;并对膜改性条件及操作条件进行了优化。实验结果表明,采用聚多巴胺沉积改性所制备膜色谱介质的蛋白吸附/脱附性能最优。经优化得最佳膜改性条件为:聚多巴胺沉积p H值为8.7,沉积时间为6 h,沉积温度为25℃,配体分子量为70,000,配体浓度为15 g/L;最佳操作条件为:吸附缓冲液p H值为7.5、Na Cl浓度为0 m M,脱附缓冲液p H值为7.5、Na Cl浓度为1000 m M。在最佳条件下,膜色谱介质动态结合容量可达49.1 mg/m L,脱附率为92%。经5次循环使用后,膜色谱性能无明显下降,具有良好重复使用性。