新型磷脂双层膜体系的构建及应用

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细胞是生命的最基本单位,它的所有新陈代谢过程几乎都与生物膜息息相关,然而由于生物膜的分离和纯化过程涉及很多苛刻的条件,所以国际上广泛地采用人工构筑的脂双层膜来研究生物膜的结构、性质和功能。生物膜上的离子通道是细胞与周围环境进行物质交换和信号传导的重要途径,如何利用支撑膜体系进行离子通道的检测一直是科学家关注的热点。近年来,聚苯胺因其自身独特的性质在生物传感器领域中格外的重视。本文首先将聚苯胺与固体表面支撑的磷脂双层膜相结合,用电化学法在金基底上沉积了一层聚苯胺膜,硫酸溶液中的循环伏安(CV)曲线和铁氰化钾溶液中CV曲线表明,电化学法所制备的聚苯胺导电性能良好;而后在聚苯胺修饰的金基底上制备了磷脂双层膜,电化学阻抗谱(EIS)曲线和荧光漂白图像证明了磷脂膜的形成;最后利用离子载体(缬氨霉素)将钾离子载入制备好的磷脂双层膜中,EIS结果表明载入了钾离子的磷脂双层膜的膜电阻小于未载入离子的磷脂双层膜的膜电阻,因此成功制备了钾离子传感器,该方法制备的钾离子传感器对钾离子的浓度响应范围为1~25mmol/L。目前常规电极表面制备的磷脂双层膜阻抗较低,漏电电流较大,难以用于离子通道的研究,针对以上现状,本课题构建了一种新型的高阻抗支撑膜体系。首先在十八烷基三甲氧基硅烷(ODS)修饰的ITO电极上探索了电极面积的控制,可控的最小电极半径为30μm。在ODS修饰的ITO电极和裸ITO电极表面分别构建了高阻抗磷脂膜体系。通过对比加入egg PC前后与电极接触的液滴形态的变化,以及相应的CV、EIS测试,可证明在液滴和ODS修饰的ITO电极及裸ITO电极之间分别形成了磷脂单层膜和磷脂双层膜。根据EIS拟合数据可得,ODS修饰的ITO电极表面所制备的单层磷脂膜电阻为21.6MΩ,裸ITO表面制备的磷脂双层膜电阻最高可达80MΩ,该值均高于目前在相同基底上制备的磷脂膜体系。由于该方法制备的磷脂膜体系中没有漏电电流,因此能达到较高的电阻。
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