重症急性胰腺炎大鼠结肠壁肌间神经丛VIP、NOS神经元表达与胃肠动力变化的研究

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目的:该课题旨在研究重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)大鼠结肠壁肌间神经丛(Myenteric plexus,MP)血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP),一氧化氮合成酶(Nitric oxide synthase,NOS)阳性神经元表达与胃肠动力变化的研究,进一步探讨引起SAP大鼠胃肠动力变化的机制。这将为重症急性胰腺炎胃肠动力紊乱的临床治疗及基础研究提供一定的理论依据。方法:60只SD大鼠,随机分为假手术(sham operation,SO)组、SAP组,每30只。SO组大鼠在麻醉开腹后仅轻轻翻动十二指肠以及胰腺;SAP组构造重症急性胰腺炎模型,各组开腹后即于幽门近端置入1根银丝电极便于造模成功后监测胃消化间期复合肌电:(interdigestive myoelectric complex,IMC),每只大鼠以2ml/100g生理盐水尾静脉注射补液,4h/次,24h后再次麻醉开腹,观察大鼠腹腔各脏器情况,予以碳素墨水2ml/只灌胃,20min后处死大鼠取胰腺作病理学检查,小肠组织行小肠推进比测量、病理学检查,取结肠组织制备结肠MP标本,采用双重免疫荧光技术检测VIP以及NOS免疫阳性神经元表达情况。结果:1.腹腔内各脏器大体情况:SAP组大鼠腹腔内发现有明显的褐色腹水,皂化斑可见,胃肠充血,积气积液,水肿,胰腺出血坏死,组织溶解;假手术组未见上述改变。2.经双重免疫荧光检测,与SO组比较SAP组结肠壁MP中NOS,VIP阳性神经元表达均明显增加(P<0.01),有显著的统计学意义。3.生物机能试验记录仪对胃窦平滑肌IMC监测结果提示:SO组IMC周期以及IMCⅠ、Ⅱ相时间显著低于SAP组(P<0.01);IMCⅢ相时间、Ⅲ相锋电振幅及频率高于SAP组(均有P<0.01)。4.小肠推进比例SO组小肠推进比值较SAP组明显增大,(P<0.01),有显著统计学意义。5.胰腺,回肠病理检测结果SO组胰腺镜下未见明显的病理变化,SAP组镜下发现胰腺组织出现较大面积坏死溶解,炎症细胞浸润明显,大部分腺叶间明显增宽,腺泡细胞坏死。SO组大鼠回肠粘膜未见明显病理变化,SAP组大鼠回肠绒毛上皮下间隙明显扩张,上皮顶端与固有层显著分离,绒毛脱落,同时可见固有层毛细血管暴露、出血及溃疡。6.胰腺,回肠病理学评分结果与SO组比较,SAP组胰腺组织病理学评分高,(P<0.01),回肠黏膜病理学评分显著升高,(P<0.01)。7.相关性分析结果结肠壁MP中VIP,NOS阳性神经元表达数与IMC周期,IMCⅢ相时间,IMCⅢ相锋电振幅、频率,小肠推进比行spearman相关性分析,分析发现大鼠结肠壁肌间神经丛VIP,NOS阳性神经元数与IMC周期呈正相关(P<0.01),与IMCⅢ相时间,IMCⅢ相锋电振幅、频率,小肠推进比均呈负相关(均有P<0.01)。结论:1.SAP大鼠结肠壁神经丛NOS,VIP神经元发生高表达性重塑。2.SAP大鼠有胃肠动力减弱。3.SAP大鼠胃肠动力障碍可能与结肠壁MP内的VIP,NOS神经元高表达性重塑有关。
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