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翘鳞伞(Pholiotasquarrosa)为我国民间常用的食(药)用真菌。在本文中,用组织分离法分离从新疆玛纳斯林场采拾的翘鳞伞菌种,采用rDNA-ITS序列分析的方法鉴定菌种,并对菌丝体生长及人工栽培进行研究。
主要试验结果如下:
1.采用组织分离法从(疑似)翘鳞伞子实体上进行菌种分离,接种在PDA培养基,分离得到纯培养菌丝体。
2.采用rDNA-ITS序列分析的方法对(疑似)翘鳞伞菌株进行了分子鉴定。利用ITS扩增通用引物扩增了该菌株的rDNA-ITS序列,经TA克隆后将转化菌落测序,经鉴定为翘鳞环锈伞。
3.采用单因素实验筛选出了适宜菌丝生长的最适生长温度为23℃,最适pH为5。最佳碳源为麦芽糖、氮源为酵母粉。
4.对发酵培养基进行了优化:利用Plackett-Burman方法获得影响翘鳞伞生长的主要因素为K2HPO4、麦芽糖、酵母粉,通过最陡爬坡实验和正交实验确定了翘鳞伞液体生长的最优培养基配方为麦芽糖35g/L、酵母粉1.5g/L、K2HPO40.5g/L、KH2PO40.5g/L、MgSO40.5g/L。
5.成功驯化出翘鳞伞子实体。栽培研究表明:翘鳞伞可在以木屑、棉籽壳为主料,麸皮、玉米面、石膏、磷酸二氢钾为辅料的罐头瓶栽培料上正常生长发育,一年两次栽培,接种到子实体采收约120-130天,生物学效率达53%。