PRDX1在大鼠创伤性脊髓损伤后的表达

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目的1.通过实验测定并观察PRDX1在成年大鼠脊髓损伤后的时间与空间表达变化、分布、细胞定位情况,初步推测PRDX1与脊髓损伤后各神经细胞生命活动的关系。2.通过体内、体外实验研究PRDX1在特定神经细胞增殖过程中的表达变化,探讨PRDX1在脊髓损伤中的调控机制及其在脊髓损伤与修复中的生物学作用。方法1.使用改良Allen’s法制作成年SD大鼠胸9节段损伤模型,利用蛋白质印迹试验、免疫组织化学及免疫荧光共标等实验技术测定并观察PRDX1在大鼠脊髓损伤后的表达变化、组织分布及细胞定位情况。2.使用LPS刺激体外培养的星形胶质细胞、小胶质细胞,建立脊髓损伤后炎性细胞模型,通过细胞转染si RNA等技术观察PRDX1及细胞增殖核抗原(PCNA)的表达变化,进一步研究PRDX1在星形胶质细胞与小胶质细胞增殖过程中的作用。结果蛋白质印迹实验提示PRDX1在脊髓损伤后5天内表达量随时间增加,随后逐渐下降。免疫组化实验结果提示PRDX1主要在白质中表达。免疫荧光共标实验结果提示:脊髓损伤后星形胶质细胞及小胶质细胞数量明显增加。在脊髓白质中,PRDX1与PCNA、星形胶质细胞标记物GFAP、小胶质细胞标记物CD11b存在共定位。在体外培养的经LPS刺激的星形胶质细胞及小胶质细胞中PRDX1与细胞增殖相关。结论脊髓损伤后PRDX1上调,并能促进星形胶质细胞及小胶质细胞的增殖。
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