高效液相色谱法检测甜菜红色素的方法研究

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甜菜红色素(Betalnins)是一种水溶性含氮类色素,主要存在于红甜菜(俗称紫菜头)、商陆、火龙果、紫茉莉、鸡冠花及仙人掌属的某些植物体中,是优良的食用红色色素和黄色色素来源。作为一种天然的食用色素,它不仅着色力强,安全无毒,而且具有很高的营养价值,是世界通用的安全无毒的天然色素之一。目前,我国在对其检测方法主要是分光光度法,与国外相比还存在很大的差距,因此国家特立专项对其检测方法进行研究。本论文运用高效液相色谱仪作为检测手段对食品中甜菜红色素的分析方法做了比较系统的研究,根据高效液相色谱法的特点,以及甜菜红色素的性质,选择了最佳的分析条件。论文中选取了对分析检测效果影响较大的色谱柱、流动相、流动相配比、流速、最大的吸收波长以及柱温等条件作为变量因子,考察HPLC法分析甜菜红色素的色谱条件。通过对方法的精密度、检测限、样品稳定性以及加标回收实验,对本方法的方法学进行了考察。通过实验,得到最优的色谱条件:采用反相Shim-pack vp-ODS色谱柱(150mm×4.6mm i.d.,5μm),流动相为A:甲醇、B:2%冰醋酸缓冲液(A:B =20:80 v/v),流速0.8ml/min,检测波长为535nm,室温条件下。结果表明甜菜红色素质量浓度在0.0641~3.206mg/ml范围内具有良好线性关系(r=0.9999),相对标准偏差为0.82%。,回收率为97.58~102.1%。本论文还探讨了HPLC方法中影响测量不确定度的因素并进行分析和评定,更加完整地对测量结果质量有一个定量的描述,以便使新建立的分析方法更加系统和可靠。采用高效液相色谱分离测定甜菜红色素已有报道,但多采用梯度洗脱,较为繁琐,同时采用的洗脱剂多为毒性较大的乙腈,不利于日常检测工作的需要。而本课题完成的利用高效液相色谱法对甜菜红色素分析方法研究,方法操作简便、灵敏、可靠、具有切合实际的参考价值,适用于甜菜红色素的分析测定。
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