近年来,应用于蛋白质选择性识别与分离的分子印迹技术逐渐受到相关领域研究者的关注,然而目前仍然存在蛋白模板稳定性较差与印迹识别层的形成难以控制等问题。针对以上问题,本文以细胞色素c（Cytc）末端肽段为模板,以4-氰基-4-（苯基硫代甲酰硫基）戊酸（CPCP）为链转移试剂,通过可逆加成-断裂链转移（RAFT）策略在二氧化硅基质上制备了三种抗原决定基分子印迹聚合物。通过高效液相色谱（HPLC）研究了上述分子印迹聚合物（MIPs）的特异选择性、吸附等温性、吸附动力学过程、重复利用性和在实际样品中的应用。首先,以Cytc的C-末端九肽（AE-9）为模板,以甲基丙烯酸锌（ZDMA）为主要功能单体在硅球上制备抗原决定基印迹聚合物。该印迹聚合物对AE-9的结合能力达到1.02 mg/g,印迹因子（IF）为2.82,对Cytc的结合能力达到9.96 mg/g,IF为1.29,并可在120 min内达到吸附平衡。此外,以ZDMA作为功能单体合成的MIPs对Cytc识别性能优于以甲基丙烯酸铜作为功能单体合成的MIPs。在此基础上,以乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,甲基丙烯酸锌为单功能单体制备抗原决定基印迹聚合物（CPCP-MIPs）。CPCP-MIPs对Cytc和AE-9的吸附性能分别为64.76和9.83 mg/g,IF分别达到了7.96和6.17,可在600 min内达到对Cytc的吸附平衡。经过六次的吸附-脱附循环后,CPCP-MIPs对Cytc的吸附仍保持在原来的76.5%以上。最后,采用Cytc的C-末端九肽和N-末端九肽（GI-9）为双模板,制备了双模板抗原决定基印迹聚合物（CPCP-EMIPs）,其对Cytc、AE-9和GI-9的结合能力分别为104.64、10.22和8.05 mg/g,IF分别为5.14、4.44和1.70。结果表明,CPCP-EMIPs对AE-9的吸附性能高于GI-9,说明在印迹位点形成的过程中模板肽段AE-9具有主要贡献。该印迹聚合物对Cytc可在600 min内达到吸附平衡。经过四次的吸附-洗脱循环后,CPCP-MIPs对Cytc的吸附仍保持在原来的77.5%以上。在以上的制备的三种印迹材料中,CPCP-EMIPs对目标蛋白的结合能力最好,但CPCP-MIPs的IF最高。三种印迹材料的都高于未采用RAFT策略制备的印迹材料对模板肽和目标蛋白的印迹效果,说明了RAFT策略在增强印迹效果上发挥了重要作用。在三种不同蛋白竞争识别中,CPCP-MIPs和CPCP-EMIPs对目标蛋白具有强的选择性和低的非特异性吸附。此外,通过HPLC分析结果证实了CPCP-MIPs和CPCP-EMIPs对成牛血清样品中的Cytc具有良好的选择性识别能力,证明了其在较复杂生物样品中对目标蛋白的识别具备一定的应用潜力。