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WJ-38,即2-[6-甲氧基-3-（2,3-二氯苯基）甲基-4-氧代-1,4-二氢-1（4H）-喹啉基]乙酸,是根据醛糖还原酶的结构而设计合成的一种新型的喹啉酮乙酸类化合物,它在体内外均表现出较强的醛糖还原酶抑制活性,有望用于糖尿病并发症的治疗,拟申报一类新药。本论文以WJ-38为研究对象,考察了其对糖尿病大鼠多元醇通路代谢的抑制作用,阐明了其在大鼠体内的吸收、分布及排泄的过程和特点,推测了其在大鼠体内外的主要代谢途径,测定了其与大鼠和人血浆蛋白的结合率,研究结果为WJ-38的剂型设计和临床研究提供了参考依据。一、WJ-38对糖尿病大鼠多元醇通路代谢的抑制作用建立了测定大鼠红细胞中内源性山梨醇浓度的柱前衍生化HPLC-UV分析方法,考察了WJ-38对糖尿病大鼠多元醇通路代谢的抑制作用。结果表明,腹腔注射链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病后,测得其红细胞中的山梨醇水平显著高于正常大鼠,提示高血糖情况下多元醇通路代谢被激活而导致细胞中山梨醇聚积。以16.7, 50和150mg·kg-1的剂量连续灌胃给予糖尿病大鼠WJ-38 16周后,各剂量组大鼠红细胞内山梨醇的水平显著降低,WJ-38的作用效果与阳性药epalrestat相当,提示WJ-38能够有效抑制糖尿病大鼠多元醇通路的活性,延缓或阻止糖尿病并发症的发展进程。二、WJ-38在大鼠体内的吸收动力学研究建立了测定大鼠血浆中WJ-38浓度的LC-MS/MS分析方法,考察了 WJ-38在大鼠体内的吸收动力学行为。以16.7, 50和150mg·kg-1的剂量单次灌胃给予大鼠WJ-38后,药物的Cmax分别为 854±548,1006±403 和 2974±1001ng·mL-1,Tmax分别为1.8±0.8,1.4±0.7和0.7±0.2h,AUC0-t分别为 3681 ± 1486, 5919± 1360和 13045±6207ng.h.mL-1,AUC0-∞分别为 3953±1614, 6241 ± 1253 和 13278 ±6280 ng·h.mL-1,t1/2 分别为 3.0 ±0.7,3.3 ±1.1 和 3.2 ±0.5 h。统计学分析结果表明,在所考察的剂量范围内,WJ-38在大鼠体内具有线性药代动力学特征。以50 mg·kg-1的剂量单次尾静脉注射给予大鼠WJ-38后,Cmax为503100 ± 289807 ng·mL-1,AUC0-t为 208232 ± 85308 ng.h.mL-1,AUC0-∞为 208883 ±84730 ng.h.mL-1,t1/2 为 3.7 ± 1.5 h。WJ-38在大鼠体内的动力学过程符合二室模型,WJ-38的绝对生物利用度为3.5%。三、WJ-38在大鼠体内的组织分布研究采用已建立的LC-MS/MS法,研究了以50 mg·kg-1的剂量单次灌胃给药后,WJ-38在大鼠体内的组织分布情况。给药后0.5 h,各组织中即能检测到较高浓度的WJ-38,说明WJ-38在大鼠体内分布广泛且迅速。1 h时,心、肝和肾等组织中WJ-38的浓度到达峰值。除小肠和胃外,肾和肝组织中的药物浓度较高。在脑组织中能够检测到少量的WJ-38,说明其可以透过血脑屏障。5 h时,各组织中WJ-38的浓度已显著下降,12 h时,各组织中WJ-38的浓度已降至峰值的10%以下,表明WJ-38自大鼠体内的消除较快,基本不蓄积。五、WJ-38在大鼠体内的排泄研究建立了测定大鼠排泄物中WJ-38浓度的LC-MS/MS法,考察了以50 mg.kg—1的剂量单次灌胃给药后,WJ-38在大鼠体内的排泄情况。给药后0～96h,WJ-38在大鼠尿液和粪便中的累积排泄量为66.6±12.9和5226± 1339μg,分别占给药量的0.7和52.3%,药物自体内排除的高峰主要出现在8～24 h。给药后0～48 h,WJ-38在胆汁中的累积排泄量为612 ± 135μg,占给药量的6.1%。结果表明,大鼠灌胃给药后,WJ-38主要以原形的形式随粪便排泄。六、WJ-38在大鼠体内外的代谢研究采用LC-MSn法,对单次灌胃给药后大鼠尿样、粪样、胆汁、血浆中及肝微粒体孵育体系中WJ-38的代谢产物进行了追踪。在大鼠体内外共发现并鉴定8个代谢产物,包括4个羟基化代谢产物,1个去甲基化代谢产物,1个去甲基及羟基化代谢产物以及2个羟基化后与硫酸的结合物。结果表明,WJ-38在大鼠体内主要经历羟基化、去甲基化及羟基化后与硫酸结合等代谢途径,大鼠肝微粒体中的CYP450酶能够有效的催化WJ-38发生羟基化及去甲基化反应。七、WJ-38与血浆蛋白结合研究采用平衡透析法,测定了不同浓度(1000, 2000和4000 ng·mL-1)范围内,WJ-38与大鼠、人血浆蛋白的结合率。在三个浓度下,WJ-38与大鼠血浆蛋白的结合率分别为97.9±0.4,98.2±0.7和98.2±0.2%,与人血浆蛋白的结合率分别为99.6±0.1,99.6±0.1和99.7±0.1%。结果表明,在所考察的浓度范围内,WJ-38与大鼠、人血浆蛋白的结合率均大于97%,属高度结合,同一种属不同浓度WJ-38的血浆蛋白结合率无显著性差异,不同种属WJ-38的血浆蛋白结合率存在显著性差异。