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本研究选择浙江赤灵芝(Ganoderma lucidum)子实体为原料,采用微波协同超声波提取水溶性多糖进一步采用碱液提取碱溶性灵芝多糖,并对超声提取的水溶性多糖进行了分离纯化,水溶性多糖和碱溶性多糖及两种多糖的化学修饰产物的生物活性等方面进行了较为系统的研究:1.研究了不同产地的灵芝中总糖、还原糖、粗纤维、脂肪、蛋白、水分、灰分等含量的变化,结果表明浙江龙泉产的赤芝非还原含量最高,为20.4%,相对其多糖含量也最高,因此选择浙江龙泉产的赤芝作为灵芝多糖的提取原料。研究了不同生长阶段对灵芝功效成分动态积累的影响规律,结果显示:赤芝的生长期过程中,灵芝三萜含量从1.398%降到0.845%,蛋白含量从20.82%降到10.30%,多糖含量从0.25%增大到0.61%然后又下降为0.53%。灵芝多糖含量在灵芝成熟期(入土50~80天)最高,达到0.61%,于灵芝衰老期(入土80天以后)逐渐降低。2.采用超声-微波协同萃取法提取赤灵芝子实体中的水溶性多糖(UCP),确定了灵芝水溶性多糖的最佳提取条件:微波功率284W,超声功率50W,提取时间12min,料液比1:11.5,灵芝多糖得率为3.35%,超声-微波协同萃取法的灵芝多糖得率与传统水浴浸提法相比提高了115.56%。从超声微波提取后的残渣中,再进一步利用NaOH溶液提取碱溶性灵芝多糖(ACP),确定了碱溶性灵芝多糖的最佳提取条件为:碱提温度60℃,碱提时间80min,NaOH浓度5%,液料比为1:20,测得碱溶性灵芝多糖得率为8.04%。3.超声波提取多糖经聚酰胺、DEAE Sepharose Fast Flow层析、Sephacryl S-500HR层析后获得五种灵芝多糖组分(UCP-F1-1~UCP-F1-5),通过HPLC及CE鉴定了UCP-F1-1和UCP-F1-2组分的均一性分布。结果表明UCP-F1-1和UCP-F1-2具有均一的分布特性,且其平均相对分子量分别为2.52×106 Da和2.34×106Da。而UCP-F1-3、UCP-F1-4组分的平均相对分子量分别为2.27×106 Da和2.19×106 Da。4.UCP-F1-1是由→4) Glcp (1→构成的主链,在→4) Glcp (1→的6位有分支,且每十个→4) Glcp (1→在6位有一个分支点; UCP-F1-1是由→6) Glcp (1→和→4) Galp (1→构成核心的支链,它们的摩尔比6:1。UCP-F1-2是由→4) Glcp (1→构成的主链,→4) Glcp (1→在6位上有分支,且六个→4) Glcp (1→在6位有一个分支点;UCP-F1-1是由→6) Glcp (1→构成其支链。5.小鼠体内免疫功能实验表明,UCP和ACP的高、中、低剂量组的血清溶血素含量,ACP高、中、低剂量组和UCP高剂量组的小鼠迟发型变态反应(DTH),ACP高剂量组的小鼠碳廓清能力,UCP高剂量组和ACP中、高剂量的小鼠NK细胞活性,UCP低剂量组的小鼠胸腺指数,与对照组比较均有显著性差异(ρ<0.05)。说明两种灵芝多糖均能提高小鼠的免疫功能,ACP的作用优于UCP。且灵芝多糖对小鼠免疫功能的增强作用并不是剂量越大越好,而是存在最适剂量。UCP及纯化后的样品UCP-F1-1～UCP-F1-5三个剂量对大鼠淋巴细胞的增殖能力均无显著性差异。6.为了提高灵芝多糖的免疫活性,以两种灵芝多糖作为原料,通过化学分子修饰,制备了四种灵芝多糖的衍生物,分别为羧甲基碱溶性灵芝多糖(CACP)、羧甲基水溶性灵芝多糖(CUCP)、碱溶性灵芝多糖乙酰水杨酸酯(AACP)以及水溶性灵芝多糖乙酰水杨酸酯(AUCP)。并进行了大鼠淋巴细胞的增殖试验,试验结果表明与对照组相同剂量比较,CUCP中剂量组、CACP中剂量组、AACP中剂量组、AACP高剂量组ConA诱导的淋巴细胞增殖能力显著升高(ρ<0.05),提示该供试品对大鼠细胞免疫功能具有提高作用。经过羧甲基改性后的产物CUCP生物活性优于改性前的水溶性多糖UCP,而乙酰水杨酸酯化的碱溶性多糖AACP的生物活性优于ACP,说明羧甲基化和乙酰水杨酸酯化对灵芝多糖的免疫活性均有提高作用。