乳酸菌素LLC518对单核增生李斯特氏菌作用机理的研究

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乳酸菌细菌素具有高活性、无毒且易被蛋白酶降解等优点,可以抑制或杀死食品中的致病菌和腐败菌,因而可作为天然的食品防腐剂,在食品工业中具有潜在的应用价值。本文以乳酸菌素LLC518为研究对象,探讨了乳酸菌素LLC518对单核增生李斯特氏菌ATCC19115的作用机理,为其在食品防腐剂的应用和开发提供理论基础。本研究采用硫酸铵沉淀、Sephadex G-50凝胶层析方法制备乳酸菌素LLC518粗样品。结果表明:经过Sephadex G-50凝胶层析后,收集活性峰,为后续试验提供研究材料。采用稀释法测定了乳酸菌素LLC518对单核增生李斯特氏菌ATCC19115的最低抑菌浓度(MIC),探讨了乳酸菌素LLC518对单核增生李斯特氏菌生长的影响。结果表明:最低抑菌浓度为0.275mg/mL,并且在2×MIC浓度下对单核增生李斯特氏菌ATCC19115的作用方式为杀菌并伴有细胞溶解。通过比较乳酸菌素LLC518在能量化和非能量化细胞中的作用效果,发现乳酸菌素LLC518对能量化的敏感菌抑制作用更好,并且相对高水平的能量化(100mmol/L葡萄糖)更能促进乳酸菌素LLC518诱导敏感菌细胞死亡通过测定敏感菌细胞紫外吸收物质、△pH和△φ的变化,探讨了乳酸菌素LLC518对敏感菌的作用机理研究。结果表明:乳酸菌素LLC518作用后的单核增生李斯特氏菌ATCC19115胞内紫外吸收物质发生了不同程度的外泄,同时破坏了△pH和△φ,引起质子动力(PMF)的耗散,最终导致细胞死亡。综合各试验指标,可以推测乳酸菌素LLC518对单核增生李斯特氏菌ATCC19115的作用机理主要是破坏细胞膜,通过形成非选择性孔洞使胞内物质泄漏,导致细胞死亡。
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