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乳腺癌作为一种常见的恶性妇科肿瘤,是导致女性肿瘤患者死亡的最主要原因之一。阿霉素和紫杉醇是目前广泛应用于临床治疗乳腺癌的一线化疗药物,而化疗引起的多药耐药(MDR)是临床肿瘤治疗的一大困境,往往提示疾病预后差。P-糖蛋白(P-gp)是属于腺苷三磷酸结合盒(ABC)转运蛋白超家族的一种已知跨膜糖蛋白能作为ATP依赖的药物泵外排一系列底物,是肿瘤多药耐药的经典机制。氟维斯群(Fulvestrant, ICI182,780)是一类新型的纯雌激素受体(ER)拮抗剂,在之前研究中,我们利用ER-α阴性的BCap37细胞稳定转染ER-α表达载体得到ER-α阳性的BCap37细胞,发现氟维斯群能够增强ER-α阳性BCap37细胞对抗微管类药物的化疗敏感性,联合使用氟维斯群能够显著逆转雌激素受体介导的化疗耐药。本课题我们主要利用起源于BCap37细胞的乳腺癌耐药细胞株Bats-72和Bads-200探讨氟维斯群逆转P-gp介导的非雌激素受体依赖的肿瘤多药耐药的体内外作用及其机制。一系列的体外实验表明氟维斯群可以明显增强阿霉素和紫杉醇对雌激素受体阴性多药耐药细胞株Bats-72、Bads-200和KBv200的细胞毒性,且呈剂量正相关。与其他P-gp调节剂相比,氟维斯群的体外逆转效能与维拉帕米相近,比他莫昔芬有效。同时氟维斯群能增强阿霉素诱导的Bats-72和Bads-200细胞的细胞凋亡、G2/M细胞周期阻滞以及cyclin B1蛋白表达水平。蛋白印迹检测证实单独处理或联合使用阿霉素和氟维斯群均不会改变P-gp的表达水平。共聚焦显微镜观察发现氟维斯群增加Bats-72和Bads-200细胞内阿霉素的聚积和滞留。这提示氟维斯群的逆转作用不是通过下调P-gp的表达水平实现,而主要归因于抑制P-gp介导的药物外排。氟维斯群不仅可以促使阿霉素在Bats-72和Bads-200细胞内聚积还能促使阿霉素进入细胞核,表明氟维斯群还能促使阿霉素到达细胞核靶点位置,这可能是氟维斯群逆转阿霉素耐药的另一种潜在机制。P-gp的APT酶检测发现氟维斯群能刺激APT酶的活性,证实氟维斯群是作为P-gp的转运底物从而抑制P-gp药物外排泵作用。体内Bats-72移植瘤实验进一步表明联合使用氟维斯群可以增强紫杉醇的抗肿瘤效果,这提示氟维斯群具备较好的体内逆转效能。以上结果说明氟维斯群是一种有效的选择性P-gp调节剂,能通过抑制P-gp外排泵作用显著逆转P-gp介导的多药耐药,且同雌激素受体表达与否无关。因此氟维斯群不仅仅能调节或抑制乳腺癌细胞雌激素受体介导的信号通路,还可应用于乳腺癌多药耐药的逆转治疗。该研究课题及其成果为临床应用氟维斯群治疗转移性和进展期乳腺癌提供新理论依据。