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一、目的:拟在研究人股骨头骨坏死标本骨结构的基础上,探索坏死股骨头内miRNA-214表达与局部成、破骨细胞活性之间的关系及潜在机制,制备腺相关病毒搭载miRNA-214抑制剂,观察药物调节成骨、破骨活性防治大鼠股骨头骨坏死塌陷的效果。二、方法:①2015年3月至2016年5月期间,收集我院16例股骨头骨坏死标本。标本进行Micro-CT扫描后,根据骨质密度的不同,将每个标本分为不同区域,分别采用病理学检测、实时荧光定量PCR、WesternBlot等方法对骨微观结构及成骨、破骨细胞活性进行分析。PCR检测股骨头骨坏死标本骨组织,观察不同区域成骨、破骨相关基因表达情况及miRNA-214表达情况。②制备以腺相关病毒为载体的miRNA-214抑制剂药物,评价其体外调节成骨、破骨的能力。③建立大鼠股骨头骨坏死模型,观察AAV-anti-miRNA-214药物的治疗效果。三、结果:①标本坏死区域miRNA-214表达显著增高,破骨活性显著增高,成骨活性显著降低。而硬化区成骨活性显著增高,破骨活性显著降低。同时,miRNA-214在股骨头骨坏死标本坏死区域显著增高;②成功制备AAV-anti-miRNA-214,发现其能够明显抑制破骨细胞的功能,促进成骨细胞的功能,同时可以显著下调miRNA-214的表达,TRAP染色结果显示AAV-anti-miRNA-214可以显著抑制骨髓间充质干细胞向破骨细胞分化的能力。MC3T3-E1 细胞加入AAV病毒包裹的anti-miRNA-214 , 发现AAV-anti-miRNA-214能够明显促进成骨细胞的功能,ALP染色的结果显示成骨细胞的功能增强;③AAV-anti-miRNA-214可以促进成骨活性,抑制破骨活性,防治大鼠股骨头骨坏死塌陷。四、结论:AAV- anti-miR-214可以促进成骨活性,抑制破骨活性,其双向调节作用可有效防治大鼠早期股骨头骨坏死塌陷。