研究背景 当归在中国应用已有两千余年的历史，是中医重要的调经、补血药，对痛经的疗效尤为确切，服药后可使患者经前、经期及经后腹痛减轻，并能促进子宫发育，使分泌物减少，炎症减轻。早在50年代初期，我国学者即对当归在离体子宫平滑肌方面的作用做了较为详细的研究，并证实当归中含有抑制和兴奋子宫平滑肌两种成分，具双重作用，且抑制成分主要为其中的精油，对多种动物的离体子宫平滑肌具有松弛作用。 痛经为妇科常见疾病，现代研究表明，痛经分为原发性和继发性两种。原发性痛经常见于未生育之青少年，其生殖器官无器质性病变，主要与月经时子宫内膜合成与释放前列腺素有关，该类痛经患者子宫内膜与经血中PG含量较正常妇女明显升高，PG可刺激子宫收缩，引起子宫血流不足，并使子宫基础张力升高，收缩频率加快，异常的子宫收缩导致子宫缺血缺氧而引发痛经；继发性痛经则是由于盆腔器质性病变引起，例如子宫内膜异位症、盆腔炎、子宫肌腺病、子宫息肉等，这些炎性疾病均会引起下腹广泛、持续的疼痛，并以痛经为其典型症状。 尽管单味当归及其制剂在临床上对痛经有较好的疗效，且动物实验亦 第四旱医大学硕士学位论文 表明当归精油对多种动物的离体子宫平滑肌具松弛作用，使张力下降，节 律变慢，收缩力减弱，但当归治疗痛经是否的确是其中的精油在起作用？ 除能松弛子宫平滑肌外，是否还具有镇痛、抗炎作用？其松弛子宫平滑肌 的机理何在？对这些问题尚缺乏了解。故本课题拟提取当归中的精油，分 析其化学成分，从镇痛、抗炎、对于宫平滑肌及小鼠痛经模型的影响以及 松弛子宫平滑肌的机理几方面对当归的抗痛经作用作较为系统的研究，为 当归的临床应用提供实验依据。 方法 以甘肃氓县产新鲜当归为实验用药材，粉碎后以无水乙醇冷浸，回流 提取。提取液经旋转蒸发仪减压浓缩后，得到浸膏。浸盲以水蒸气蒸馏法 提取，馏出液以 NaCI饱和后，以石油醚（30～60oC）：乙酸乙酯一 85：15 革取，无水NdiSO4干燥。减压浓缩后即得当归精油。精油以GC／MS技术 进行成分分析，得到的组分通过质谱裂解机理、标准图谱对照以及相关资 料的查阅进行成分鉴定，并根据总离子流图采用峰面积归一法定量。 采用化学刺激物（醋酸）注入小鼠腹腔致疼痛及雌性小鼠痛经模型进 行镇痛实验；通过对正常和经缩宫素处理的小鼠离体子宫平滑肌实验，观 察当归精油对子宫平滑肌的收缩幅度、收缩频率及活动力的影响；应用非 特异性的急性炎症模型（二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血 管通透性增高和蛋清致大鼠足厢肿胀）和亚急性炎症模型（大鼠棉球肉芽 肿增生），考察当归精油对急性和亚急性炎症的作用，通过以上实验为当 归精油治疗原发性和继发性痛经提供依据。 采用大鼠离体子宫平滑肌肌条，通过当归精油对缩宫素及钙离子致平 滑肌收缩、对CalllZ累积量．效曲线以及对缩宫素所致的依细胞内、外钙收 缩作用的影响，来探讨当归精油松弛子宫平滑肌的机理，为当归精油抬疗 痛经提供佐证。 结果 2 第四军匠大学硕士学位论又 精油的产率为 0石％，通过 GC／MS分析，共得到 47个组分，鉴定了 其中40种化合物，约占总量的95．5％。分析结果显示，精油中含量最高 的为菱本内酯（54．30），其次为2－乙基－l－己醇（7．0o）、＋三烷（4．8O）、 9，12－十八烯酸单甘油酯（3．8％）、9，12－十八二烯酸乙酯（3．4％）、十七 酸乙酯（3．l％）和丁烯基苯酚（2．l％）等。 镇痛实验表明：当归精油 0．3、0石、0．gg／kg三个剂量组，均能使醋 酸致小鼠疼痛和雌性小鼠痛经模型的扭体反应次数减少，与生理盐水组比 较有显著性差异沪＜0刀1）；通过离体子宫平滑肌实验发现：当归精油0．32～ 1．60mg／mL对正常小鼠离体子宫平滑肌和经缩宫素处理的小鼠离体子宫 平滑肌的收缩幅度、收缩频率及子宫活动力均有显著抑制作用，并能使缩 宫素所致的子宫平滑肌强烈收缩恢复至正常水平。 抗炎实验结果表明：当归精油 0刁、0．3g／kg均能显著抑制醋酸致小鼠 腹腔毛细血管通透性增高，抑制率分别为 45．6％和 67．4％；上述两剂量组 的当归精油对蛋清致大鼠足路肿胀的抑制作用在第2～6h表现明显 （P＜O．of或0刀5人 ?