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目的1.建立一种简单、快速的高效液相色谱荧光法(HPLC-FLD)测定血清中的色氨酸(TRP)、犬尿氨酸(KYN)和犬尿喹啉酸(KYNA)。2.初步探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清TRP、KYN和KYNA含量变化及其临床意义。方法1.血清标本经0.624mol/L高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液20μL直接进样分析测定;色谱柱为Hypersil C18柱(250mm×4.6mmi.d,7μm),流动相为0.20 mol/L醋酸锌、8.3mmol/L醋酸和2.5%的乙腈,流速为1.5ml/min;荧光检测激发波长和发射波长在0-11min为365nm和480nm,11-15.5min变换为344nm和404nm,15.5-21min为254nm和404nm;室温下测定；20分钟内完成测定;TRP、KYN和KYNA峰均采用峰保留值比较法和叠加法定性分析,用外标法测峰面积进行定量分析;同时探讨了检测波长、流动相种类、流动相中有机相的比例等因素对分离度和灵敏度的影响,考察了其它5种血清内源性物质对待测组分的可能干扰。2.测定系统性红斑狼疮(SLE)患者(n=50例)血清TRP、KYN和KYNA,初步探讨其含量变化在鉴别诊断、治疗监测、机制研究等方面的临床意义。分析血清TRP、KYN和KYNA以及KYN/TRP、KYNA/KYN比值与疾病发生、发展的相关性。结果1.KYN保留时间约为8.5 min,线性范围为0.049-98μmol/L,最低检出浓度为0.0245μmol/L,平均回收率为97.45%;KYNA保留时间约为13.7min,线性范围为1.05-1047μmol/L,最低检出浓度为0.05nmol/L,平均回收率为100.60%；TRP保留时间约为17.6min,线性范围为0.61-196μmol/L,最低检出浓度为0.005μmol/L,平均回收率为103.71%；日内和日间测定值的相对标准偏差均小于5%；苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)、5-羟色胺(5-HT)和肌酐(Cr)在本文的色谱条件下对测定均无干扰。2.与正常对照组比较,SLE患者TRP含量显著减少,KYN和KYNA的含量及KYN/TRP的比值都显著增高.而KYNA/KYN比值变化不大。结论1.本文建立了HPLC-FLD法同时测定血清TRP、KYN和KYNA,该方法的精密度,准确性,回收率,抗干扰能力,线性范围等指标均符合诊断实验的要求,具有进样量少、简单、快速、灵敏、特异的特点,适宜于临床与科研工作。2.SLE患者体内存在严重的色氨酸代谢紊乱,同时测定TRP、KYN和KYNA的含量不仅可以了解SLE患者色氨酸代谢的变化,还可以监测SLE患者体内免疫应答的状况。