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目的与意义肺癌发病率和病死率近年呈上升趋势,在全球范围内,肺癌的防治形势十分严峻。化疗是目前主要的治疗方法之一。但化疗的副作用和多药耐药严重限制了治疗效果。从天然产物中寻找高效低毒的抗肿瘤活性成分是当前抗肿瘤药物研究的重要发展战略之一。中药青蒿属菊科植物,青蒿素是青蒿叶中分离的有效抗疟成分,具有过氧基团的倍半萜内酯,体内代谢活性产物为双氢青蒿素。药物学研究证实青蒿素类药物在体内吸收快,分布广,毒性小,排泄快,具有抗疟、抗血吸虫、抗孕、调节免疫等功能。近年研究发现青蒿素类药物具有抗肿瘤作用。其高效低毒及抗癌作用的选择性已成为新的研究热点。尽管青蒿素可以抑制多种肿瘤的生长,诱导多种肿瘤的凋亡,但其抗癌作用机制目前尚未阐明。本研究首先筛选出对双氢青蒿素敏感的肺癌细胞系,在此基础上,采用流式细胞术、激光共聚焦显像、RT-PCR和Western-blot等多种方法观察双氢青蒿素诱导肺癌细胞凋亡作用及对与细胞增殖和凋亡密切相关的几种重要信号分子的影响。材料与方法本实验首先以肺癌细胞SPC-A-1、Calu-3、PC-14为研究对象,筛选出对双氢青蒿素敏感的SPC-A-1细胞系。在此基础上,通过观察双氢青蒿素对SPC-A-1细胞生长周期、凋亡及相关信号分子等方面的影响,研究了双氢青蒿素诱导SPC-A-1细胞凋亡的信号转导分子及通路。主要实验结果:1.双氢青蒿素可明显抑制肺癌细胞增殖,而SPC-A-1细胞对其更敏感。2.双氢青蒿素抑制肺癌细胞增殖主要通过诱导肺癌细胞凋亡实现。3.双氢青蒿素使肺癌SPC-A-1细胞的细胞周期阻滞在G2/M期。4.双氢青蒿素通过升高细胞内钙离子而诱导细胞凋亡,升高的细胞内钙离子来源于细胞内细胞器。是否来源于内质网有待进一步研究。5. calpain在双氢青蒿素诱导细胞凋亡通路中发挥抗凋亡作用6.双氢青蒿素使SPC-A-1细胞内survivin转录和翻译下调,survivin下调可能参与诱导凋亡。7.双氢青蒿素下调survivin参与SPC-A-1G2/M期阻滞。结论:钙离子和survivin参与了双氢青蒿素的抗肺癌细胞作用。综上所述,本实验研究了双氢青蒿素抑制肺癌增殖的现象,进一步对其诱导肺癌细胞凋亡作用进行了研究,初步探讨了其作用的分子机制,为临床治疗肺癌选择性用药提供理论和实验室依据。