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目的：载脂蛋白F（apolipoprotein F，ApoF）是近些年发现的载脂蛋白，其血浆浓度与血脂异常密切相关，本课题主要是深入研究ETS和C/EBP调控载脂蛋白F基因表达的机制。方法：1.将ApoF启动子区构建在PGL4载体上，2.通过pumbed基因数据库设计本课题先前已预测的潜在转录因子的表达框，并通过基因合成的方法构建相关转录因子表达克隆3.启动子分别与转录因子及其相应显性失活突变体共转染实验4.电泳迁移率检测和染色质免疫共沉淀从体内外验证反式作用因子和顺式作用元件的直接相互作用5.通过westernblot及realtime PCR检测人类不同组织来源细胞株的ApoF蛋白及mRNA表达水平6.通过westernblot检测人类不同组织来源细胞株的C/EBPα、C/EBPβ蛋白表达水平7.转录因子特异性siRNA实验8.从蛋白水平检测ETS-1、ETS-2、C/EBPα、ETS-1与C/EBPα、ETS-2与C/EBPα对ApoF是否具有促进作用9.免疫共沉淀实验检测转录因子之间的相互作用。结果：1.成功构建PGL4-ApoF198荧光报告基因2.将C/EBP及HNF3家族成功构建在pcDNA3.1表达载体上3.发现ApoF的蛋白和mRNA表达水平在肝组织来源的细胞株特别高4.发现转录因子C/EBPα、C/EBPβ、ETS-1蛋白表达水平在肝组织来源的细胞株特别高5.过表达HNF3对ApoF启动子无明显激活作用6.过表达C/EBP能够明显增加ApoF的启动子活性,过表达C/EBP显性失活突变体抑制ApoF启动子的活性7.特异性C/EBPsiRNA能够明显抑制ApoF的启动子活性8.ETS-1、 ETS-2、 C/EBPα、 ETS-1与C/EBPα、 ETS-2与C/EBPα对ApoF是具有促进作用，且ETS1与C/EBPα对ApoF具有协同作用。9. ETS-1可以把C/EBPα沉淀下来，且C/EBPa也能沉淀ETS-1下来。结论：1. C/EBPα转录因子直接结合ApoF的启动子，调控ApoF的转录。2.ETS-1、C/EBPα之间具有相互作用，对ApoF具有协同作用。