目的：本课题的目的主要通过体外培养软骨细胞，探讨兔膝关节软骨细胞分离、获取、培养方法及培养条件。　　方法：相对无菌条件下取不同龄兔膝关节软骨，用改良2步酶消化法收集、获取细胞，以F12培养基及不同体积分数胎牛血清、青霉素、链霉素、HEPES液混合培养基，单层种植于细胞培养器皿中，放臵于5％浓度CO2培养箱、37℃恒温、饱和湿度环境中培养，倒臵显微镜下观察细胞增殖情况及外观形态，台盼蓝染色测定细胞活性，MTT法描绘细胞生长曲线，甲苯胺蓝染色鉴定，统计学处理各实验数据。　　结果：1d龄新生兔膝关节软骨获取大量软骨细胞，存活率高。改良的2步酶消化法得到大量软骨细胞，贴壁率及细胞存活率高。F12培养基含10%体积分数血清胎牛血清、单层培养条件下，软骨细胞增殖活跃。　　结论：1d龄新生兔作为软骨细胞供体，所提取出来的软骨组织质量好，获取的软骨细胞数量大、活性好，改良的2步酶消化法对软骨细胞的伤害小。10%体积分数血清浓度适合软骨细胞生长。