柚类果实柠檬苦素类化合物组分鉴别、分离纯化及生物活性研究

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本文研究了柚类(Citrus maxima)果实不同部位柠檬苦素类化合物的组分及含量,分离纯化了主要柠檬苦素类化合物,并对纯化产物的抗肿瘤和促进葡萄糖消耗等活性进行了评价。主要结果如下:1. 利用HPLC与LC-MS鉴别了柚果实中的柠檬苦素、诺米林与异黄柏酮酸,检测了3种主要柠檬苦素类化合物柠檬苦素、诺米林和异黄柏酮酸在12个柚类品种果实不同部位中的含量差异。结果表明:诺米林与柠檬苦素为柚果实中主要的柠檬苦素类化合物;柠檬苦素、诺米林和异黄柏酮酸在柚果实不同部位的含量差异较大,这3种化合物主要存在于囊衣与种子中,汁胞与白皮层的含量水平均较低,油胞层中的含量在检测限以下;3种化合物在品种间的含量也有很大差异。其中,柠檬苦素在青田红心柚种子中含量最高,为5.45±0.86 mg/g DW;诺米林在红肉抛柚囊衣中含量最高,为10.20±1.87mg/g DW;而异黄柏酮酸含量在柚果实各个部位含量均较低,在青田红心柚种子中拥有最高含量,仅为0.58±0.05 mg/g DW。2.采用大孔树脂、高速逆流色谱(HSCCC)和半制备液相色谱(semi-pre HPLC)联用技术,建立了柠檬苦素、诺米林和异黄柏酮酸的分离纯化体系。经过HZ-816树脂初步纯化后,柠檬苦素的纯度从0.29%增加到19.80%,诺米林的纯度从0.71%增加到61.70%;经HSCCC进一步纯化得到的柠檬苦素纯度在95%以上;另外得到了较高纯度的诺米林与异黄柏酮酸混合物,此混合物通过semi-preHPLC的方法将诺米林与异黄柏酮酸成功分离,纯度均在95%以上。3.对部分柚果实粗提物和纯化后的柠檬苦素和诺米林进行促进葡萄糖消耗和抑制白血病细胞增殖的活性研究。结果表明,柠檬苦素具有较好的促进葡萄糖消耗作用,而诺米林具有一定的抑制白血病细胞增殖作用。柚果实粗提物促进葡萄糖消耗活性与抑制白血病细胞增殖活性也分别与柠檬苦素和诺米林含量呈正相关关系。
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