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目的:研究补阳还五汤及其两类有效部位生物碱、苷抗动脉血栓形成的作用,及对动脉血栓形成后抗凝和纤溶活性的影响,探讨该方抗动脉血栓形成的作用靶点及物质基础。
方法:
1.小鼠背部皮下注射1%角叉菜胶(50mg/kg),同时给予药物,于24小时后观察小鼠尾动脉血栓形成长度。
2.大鼠于实验前12小时给药一次,再于实验前给药第二次,然后在左侧颈总动脉以FeCl作用导致颈总动脉血栓形成,称取血栓重量,并以发色底物法测定血浆AT-Ⅲ、PC、tPA、PAI和PLG活性。
结果:
1.补阳还五汤原方及其有效部位生物碱和苷腹腔注射均可使由角叉菜胶诱导的小鼠尾动脉血栓长度显著缩短。
2.FeCl作用后,可致颈总动脉血栓形成。补阳还五汤原方、生物碱、苷、抵克利得和低分子肝素均可使血栓重量减轻。模型组AT-Ⅲ活性低于假手术组;与模型组比较,生物碱组、补阳还五汤原方组及低分子肝素组AT-Ⅲ活性均显著性降低。模型组PC活性与假手术组比较有所降低;苷组、原方组及低分子肝素组PC活性与模型组比较则显著性升高。
3.模型组tPA和 PLG 活性均降低,PAI活性无显著变化。与模型组比较,补阳还五汤原方可使血浆tPA、PLG活性升高,而生物碱和苷对tPA和 PLG 活性无影响。
结论:
1.补阳还五汤及其主要有效部位生物碱和苷可抑制由角叉菜胶诱导的小鼠尾动脉血栓的形成,提示该方中生物碱和苷可能为其抗血栓的主要有效物质基础。
2.补阳还五汤原方既可能通过与AT-Ⅲ结合而发挥抗凝作用,又可防止血栓形成后血浆中PC的消耗,生物碱呈现出类似的作用,即可能通过与AT-Ⅲ结合而发挥抗凝作用。苷的作用可能主要与增强Pc活性有关。
3.补阳还五汤原方还可使血浆tPA活性和PLG活性升高,提示其作用与促进纤溶功能有关;而生物碱和苷对tPA、PAI和PLG无明显影响,表明其抗血栓作用不是通过促进纤溶而实现的,其作用可能与其它环节有关。