【摘 要】
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目的:1、以人神经胶质瘤SHG细胞为研究对象,观察三种不同的葡萄糖苷神经酰胺合酶抑制剂D-PDMP、NB-DNJ、D-PPMP对SHG细胞增殖的影响。2、观察葡萄糖苷神经酰胺合酶抑制剂D-PD
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目的:1、以人神经胶质瘤SHG细胞为研究对象,观察三种不同的葡萄糖苷神经酰胺合酶抑制剂D-PDMP、NB-DNJ、D-PPMP对SHG细胞增殖的影响。2、观察葡萄糖苷神经酰胺合酶抑制剂D-PDMP导致的神经胶质瘤细胞的死亡是否为细胞凋亡。3、探讨葡萄糖苷神经酰胺合酶抑制剂D-PDMP对人神经胶质瘤细胞增殖影响的可能机制。方法:1、MTT法检测三种葡萄糖苷神经酰胺合酶抑制剂对人神经胶质瘤细胞增殖的影响。2、细胞形态学观察(吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染)、TUNEL技术、流式细胞术检测细胞凋亡。3、高效液相薄层层析(HPTLC)法检测SHG细胞神经节苷脂含量和组成的变化。4、二酰基甘油激酶(diacylglycerol kinase ,DAGK)法测定SHG细胞神经酰胺含量的变化。5、高效液相色谱(HPLC)法测定SHG细胞内神经鞘磷脂含量的变化。结果:1、D-PDMP可抑制SHG细胞的增殖,并具有浓度依赖性;D-PPMP、NB-DNJ对SHG细胞的增殖无明显影响。2、40μmol/L浓度的D-PDMP作用于SHG细胞24小时后,AO/EB染色显示细胞出现典型的凋亡形态改变,TUNEL检测可见众多TUNEL阳性细胞,流式细胞术检测可见一个亚二倍体峰。3、D-PDMP、D-PPMP、NB-DNJ对SHG细胞神经节苷脂合成的抑制率达80%以上。
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