滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae,MS）感染可引起鸡和火鸡的滑膜炎、腱鞘炎、鸡蛋尖端综合征等症状。与其他病原微生物混合感染后,加剧病原微生物致病力,导致鸡群死淘率上升,肉鸡饲料利用率降低、胴体降级,蛋鸡产蛋量下降、蛋壳质量差等现象,给家禽养殖业造成了极大的经济损失。目前该病在我国呈流行趋势。本研究建立了一种针对滑液囊支原体的荧光检测方法,以福建某肉鸡企业肉鸡群为研究对象进行MS感染的病原学检测,从MS感染的肉鸡中分离鉴定滑液囊支原体,检测其致病性和药物的敏感性,并且建立了一种快速鉴别临床分离株与疫苗株MS-H的多重PCR反应体系,为MS感染的防控奠定基础。1.根据MS基因16S rRNA保守区域设计了MS通用引物,验证引物特异性后,建立了MS的荧光检测方法。经验证该方法的检测最低检测浓度2.18×10~1copies·μL-1。对不同日龄的鸡群进行取样,检测MS阳性率。结果显示:抽样鸡群全年平均鸡群MS阳性率为28.0%,其中1-21日龄鸡群MS阳性率在0.9%-25%范围内,全年平均阳性率为4.9%,22-40日龄鸡群MS阳性率在33.3%-73.6%范围内,全年平均阳性率为56.9%。一年中1、3、4、11月份阳性率较高,推测是秋冬与冬春季节交换的月份,昼夜温差较大等气候因素造成。2.对疑似发生MS感染的肉鸡进行采样,分离鉴定出六株支原体,通过观察菌落形态、红细胞吸附实验、细菌L型鉴定、血凝实验进行鉴定,均符合MS的生物特性。针对Vlh A基因设计特异引物,其PCR扩增产物测序后与Gen Bank上上传的MS序列同源性比对分析。结果显示:分离株的Vlh A基因序列与数据库中的MS参考菌株同源性大于95%,证明本研究分离菌株均为MS;通过同源性分析发现分离株和中国HN01、5-9等MS菌株在同一分支,与疫苗株MS-H同源性较远,表明本研究分离菌株均为野毒株。3.将0.2 ml 10~8CCU/ml浓度的MS菌液通过脚垫感染7日龄SPF鸡,攻毒后7 d和14 d,采血分离血清,并解剖观察组织器官病理变化,取肝脏、肾脏、脾脏、气管等组织,用甲醛固定做病理切片;检测血清、肝脏、脾脏和肾脏的IL-1β、IL-6、INF-γ和TNF-α细胞因子水平,以及碱性磷酸酶、肌酸激酶、丙氨酸氨基转移酶等生化指标。剖检病变显示:攻毒试验组脾脏出血、肾脏肿大、肝脏肿大等病理现象;细胞因子水平检测结果显示:攻毒试验组肾脏、脾脏、肝脏组织中四种细胞因子水平高于空白对照组,其中肝脏组织中四种细胞因子水平均显著（P＜0.05）高于空白对照组,表明攻毒后MS在体内增殖,引起机体炎症反应,且该炎症反应可能最早出现在肝脏中;血清生化结果显示,攻毒试验组与空白对照组相比碱性磷酸酶水平下降,肌酐水平上升,结合肾脏组织病理切片结果,表明MS在体内增殖对肾脏造成了损伤;攻毒实验组中谷丙转氨酶水平上升,结合肝脏病理切片以及细胞因子表达水平的上调,表明MS在体内增殖对肝脏造成了损伤。4.建立了一种快速准确鉴别MS田间分离株和活疫苗MS-H的多重PCR检测方法。根据滑液囊支原体ppm和deo D基因的两个碱基突变位点,运用错配扩增突变分析（MAMA）PCR的方法,设计引物时使引物的3’末端落在突变位点上,设计了两对特异性引物。使用多重PCR扩增体系对目的基因进行扩增,通过对反应条件的优化,建立了一种通过一次PCR扩增和凝胶电泳就可鉴别出两者的多重PCR检测方法,并检测了该方法的特异性和敏感性。结果显示:本研究建立的方法能特异性扩增出滑液囊支原体活疫苗MS-H株和滑液囊支原体分离株的特异目的条带,其他几种禽类常见病原微生物无特异性扩增,具有高度特异性;对MS-H株和MS分离株最低敏感度分别为4.21×10~5和6.47×10~5copies·μL-1、检测方法对通用引物的最低检测浓度为2.18×10~3copies·μL-1,对活疫苗MS-H株和滑液囊支原体分离株菌液的检测浓度下限均为10~5CCU/ml,通用引物检测菌液最低浓度为10~3CCU/ml。本方法的建立为活疫苗MS-H株和滑液囊支原体分离株的鉴别提供了可靠的快速诊断技术手段。