竹节参(Rhizoma Panacis Japonici)为五加科(Araliaceae)植物竹节参(Panax japonicus C.A.Mey.)的干燥根茎，属土家族珍稀药物资源。竹节参含多种三萜皂苷、多糖、丰富的氨基酸及微量元素等活性物质，兼具北药人参滋补强壮和南药三七活血化瘀之功效，是一种药食两用的天然植物，在临床治疗及保健功能上均具有广泛的应用价值。目前对竹节参的研究主要集中在治疗类风湿性关节炎药物的开发上，竹节参总皂苷（Total saponins of Rhizoma Panacis Japonici，TsPJ）微波提取、大孔吸附树脂纯化工艺研究尚未见文献报道，而其体外抗肿瘤活性方面罕有文献报道。为了充分利用竹节参资源，开发以TsPJ为主要成分的新的药物和新的中成药制剂，本课题建立了TsPJ的含量测定方法，提出了适宜于TsPJ提取和纯化的最佳工艺条件，并对其体外抗肿瘤活性作了初步的探索。主要研究内容和结果如下：　　 1．TsPJ的含量测定　　 选用人参皂苷Re为标准品，采用分光光度法，以5％冰乙酸-香草醛溶液和高氯酸为显色剂，在552nm处测定吸光度。以人参皂苷Re的量(μg)为横坐标，以吸光度(A)为纵坐标，制作标准曲线，经计算得回归方程为Y=0.0046X-0.0013(R2=0.9997)，在40.48～202.40μg范围内线性关系良好，以此计算TsPJ的含量。经方法学实验结果显示，在90min内吸收值稳定，RSD为1.42%，精密度和重现性良好，RSD分别0.75%和1.51%：平均回收率为100.46%(n=5)，RSD为1.06%。此法简便灵敏，重现性良好，方法可靠，可作为竹节参总皂苷的定量方法。　　 2．TsPJ提取工艺的优选　　 以TsPJ转移率为考察指标，在单因素实验的基础上，运用正交实验设计，筛选最佳微波提取工艺；并将其与加热回流提取法及超声提取法进行比较。结果表明，以80%乙醇为提取溶剂，微波功率400W，料液比1：18，提取4次，每次提取5min，TsPJ的转移率可高达97.77%。微波提取工艺具有效率高、时间短、能耗低、环保等优点，为TsPJ的工业化生产和新药开发提供了依据。　　 3．TsPJ纯化工艺的优选　　 采用静态吸附和动态吸附考察相结合的方法，筛选了5种不同性质的大孔树脂，最终初步确立了D-101型大孔树脂分离TsPJ的纯化工艺：上样浓度为0.2g生药.mL-，PH值为6，径高比为1：10，以3BV70%乙醇溶液洗脱，吸附及洗脱流速均为1mL．min-1。研究结果表明，未纯化前总固物中总皂苷的含量为24.36%，纯化后总固物中的TsPJ含量为82.53%，精制度达338.81%，且转移率可达88.02%。从精制度、转移率等方面考虑，该工艺适宜于TsPJ的分离及纯化。　　 4．TsPJ对肝癌HepG2细胞凋亡作用的考察　　 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法检测不同浓度的TsPJ对肝癌HepG2细胞增殖的作用；流式细胞仪分析肿瘤细胞凋亡率。结果表明，TsPJ可抑制肝癌HepG2细胞生长，且呈浓度、时间依赖关系。用50、100、200和400μg·mL-1TsPJ处理细胞48h后，发现TsPJ可诱导细胞凋亡，凋亡率与对照组比较明显升高(P＜0.01)。TsPJ抑制肝癌HepG2细胞生长，其机制可能是通过诱导凋亡来发挥作用的。