神经营素3对大鼠急性脊髓损伤后运动功能恢复的作用及其机制的研究

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背景 脊髓损伤近年来发病率有增高的趋势并呈现出高发生率,高致残率,高耗费,低死亡率的特点。脊髓损伤可分为原发性损伤和继发性损伤两个阶段,随着研究的不断深入,人们逐渐认识到SCI后继发于初期创伤的一系列神经生化、微循环失调形成的恶性病理连锁反应(继发性损伤)是造成永久性神经损害的重要原因之一,及时有效的治疗可使病变局限,促进神经功能恢复。 神经营养素-3又称神经营养因子-3(neurotrophin-3 NT-3),是神经营养素家族的重要成员,可阻止胚胎期及出生后运动神经元细胞死亡,维持神经元的存活及促进神经损伤后的修复与再生,并参与调节神经元突触活动。体外研究表明NT-3对离体神经元的存活,轴突的生长都具有良好的作用,但是对在体研究及其机制的研究相对较少。 目的 通过构建大鼠脊髓损伤模型(Allen’s法),蛛网膜下腔给予NT-3,观察脊髓损伤后运动诱发电位(MEP)、后肢运动功能(BBB评分)的改变,评价NT-3对脊髓损伤的修复作用,并通过检测血中SOD、NOS、MDA及脊髓中神经细胞凋亡相关蛋白的表达变化,初步探讨NT-3对脊髓损伤修复作用的机制。 材料和方法 105只SD大鼠随机分成三组:对照组(生理盐水组),实验组(NT-3组),假手术组。用改良Allen’s WD法以30gcm致伤SD大鼠制作大鼠全瘫模型,经蛛网膜下腔导管于术后即刻,4h,8h,12h,24h,3d,7d注入NT-3 20μl(含NT-3 200ng),对照组在相同时间点给予等容积生理盐水,假手术组只打开椎板,蛛网膜下腔置管,不致伤,不给药。术后24h,3d,7d,14d进行MEP检测及运动功能评分,术后4h,8h,12h,24h,3d,7d,14d取血离心,利用分光光度计测定SOD和MDA、NOS吸光度来检测其含量及变化。并于相应时相点观察伤段脊髓的组织学改变(HE及Nissl染色)及神经细胞凋亡相关蛋白Bax、Bel-2、Fas的表达情况(免疫组化)。免疫组化结果用生物医学图像分析仪行平均光密度(AOD)分析,以重复资料的方差分析、t检验统计结果。
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