颞叶癫痫大鼠模型PSD中HSP27的表达

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目的:观察热休克蛋白27(Heat Shock Protein 27,HSP27)在颞叶癫痫大鼠模型突触后致密物(postsynaptic density,PSD)中的表达情况,探讨HSP27与颞叶癫痫形成的关系。方法:动物随机分为正常对照组和建模组。建立氯化锂—匹罗卡品大鼠颞叶癫痫模型,观察30天后,根据有无自发发作进一步分为颞叶癫痫组(TLE组)、非颞叶癫痫组(非TLE组)。应用蔗糖密度梯度离心法提取全脑组织的PSD蛋白成分。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,应用免疫印迹法检测HSP27在PSD中的表达。应用免疫电镜观察HSP27在海马CA1区PSD中的表达。结果:1、氯化锂—匹罗卡品大鼠颞叶癫痫模型:SE诱发成功率为91.4%,TLE组32只(45.7%),n-TLE组18只(25.7%)。2、PSD纯度的检验:突触后标志分子N-甲基-D-天(门)冬氨酸型谷氨酸受体亚基-1(NR1)和突触后致密物-95(PSD-95)在P2成分、突触体和PSD蛋白三组成分中均呈免疫印迹阳性,而突触前标志分子突触素(SynPhy)在PSD成分中呈阴性。3、PSD中HSP27表达的免疫印迹分析:在TLE组、非TLE组和正常组PSD蛋白中HSP27免疫染色均呈阳性。与正常组比较,TLE组和非TLE组PSD中HSP27的相对光密度值明显增加(P<0.05)。与非TLE组比较,TLE组PSD中HSP27的相对光密度值亦明显增加(P<0.05)。4、海马CA1区PSD中HSP27表达的免疫电镜结果:在TLE组、非TLE组、正常组三组大鼠大脑海马CA1区PSD中都可见到HSP27免疫金颗粒。与正常组比较,TLE组和非TLE组PSD中的HSP27金颗粒数明显增加(P<0.05)。与非TLE组比较,TLE组PSD中的HSP27金颗粒亦明显增加(P<0.05)。结论:PSD中HSP27参与了颞叶癫痫形成。
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