【摘 要】
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在本实验前期发现CdMYB59表达可能与狗牙根矮化、抗旱有一定关系基础上,本研究拟通过过量表达CdMYB59的转基因水稻分析其功能,并建立狗牙根遗传转化体系,为进一步获得转基因
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在本实验前期发现CdMYB59表达可能与狗牙根矮化、抗旱有一定关系基础上,本研究拟通过过量表达CdMYB59的转基因水稻分析其功能,并建立狗牙根遗传转化体系,为进一步获得转基因狗牙根奠定基础。本文主要实验结果如下:1、过量表达CdMYB59基因的转基因水稻获得及表型分析采用农杆菌介导法,获得了过量表达CdMYB59的转化水稻,经PCR检测鉴定出10株的转基因水稻阳性植株,并获得了它们的纯合体。采用实时荧光定量PCR检测,在这10个转基因水稻株系中CdMYB59基因都获得了表达。通过对生长14天的T2代转基因水稻纯合体植株与野生型植株的表型观察,发现纯合体编号O1-3、O4-10、O7-17、O9-4和O10-17在地上部株高高于野生型,编号O2-5、O3-8、O5-1、O6-13和O8-7低于野生型。我们还测量了根长,结果表明转基因水稻各个株系的根长比T2代转基因水稻分离出的野生型水稻增加了48%-106%。还分析了转基因植物的抗旱性,通过渗透胁迫(PEG-6000)处理T2代转基因水稻及野生型植株的结果发现,转基因植株的相对含水量均显著高于野生型植株,比野生型提高了36%-75%;转基因植株的相对电导率均显著低于野生型,仅为野生型的42%55%。结果表明过表达CdMYB59基因能够提高了水稻抗旱性。2、建立狗牙根遗传转化体系,获得过量表达CdMYB59基因的转基因狗牙根在建立狗牙根稳定高效的再生体系基础上,进一步建立了农杆菌介导的遗传转化方法。采用该方法获得了来自8个抗性愈伤组织的再生植株,经过PCR检测2株转基因再生植株表型为阳性。
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