副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPS）是猪Glasser病的病原菌,呼吸道常在菌,具有条件致病性。抗菌药物目前HPS病主要依托的抑菌方式,但由于长期盲目地使用,HPS对临床常用抗菌药己产生不同程度的耐药性,而耐药菌株的流行给该病的治疗带来了极大挑战。为了了解HPS临床分离菌的耐药情况、分析菌株之间的遗传相关性,本试验从河南、湖北、湖南、安徽、江西、山西、陕西等七省份代表性猪场送检的685份疑似HPS感染典型病变的肺脏、气管、脾脏、淋巴结等部位分离细菌,并对分离株进行16S r RNA鉴定,用微量肉汤稀释法观察了临床分离株对18种抗菌药物的敏感性。结果显示:共分离到HPS 206株,这些临床分离株对土霉素、恩诺沙星、林可霉素、阿莫西林、阿米卡星、泰乐菌素及复方六甲氧嘧啶钠的耐药率分别为48.5%、51.5%、26.2%、29.1%、73.8%、20.2%、和93.2%,对多西环素、复方阿莫西林、头孢噻呋、头孢喹肟、庆大霉素、氟苯尼考、喹乙醇的耐药率较低,分别为8.7%、10.7%、5.8%、1.0%、12.6%、4.9%和4.9%,而对痢菌净、泰妙菌素、替米考星、黏菌素暂时还未发现耐药情况。在选用的18种抗菌药物中,206株临床分离株耐2-5种抗菌药物居多,达到61.7%,分别有12株、9株对6种、7种抗菌药耐药,而只有8株不对任何一种抗菌药物耐药,2株仅对四环素耐药,32株仅对复方磺胺-6-甲氧嘧啶钠耐药。用PCR方法对耐β-内酰胺类、四环素类、氨基糖苷类、大环内脂类、喹诺酮类、林可胺类、恶唑烷酮类、酰胺醇类、多肽类、磺胺类、其他类等十一类抗菌药物48个耐药基因进行特异性扩增,用质粒接合试验及转化试验观察tet M基因、bla CTX-M基因的传递,用交叉定位PCR（Overlapping PCR）方法研究tet M的基因环境。结果显示:β-内酰胺类耐药基因bla TEM的检出率为17.5%,bla Rob-1的检出率为14.6%,bla CTX-M的检出率为2.4%,fts I转肽酶区氨基酸突变位点可能为第209位,238位及245位;四环素类耐药基因tet A的检出率为14.6%,tet B的检出率为20.4%,tet C的检出率13.6%,tet H的检出率为0.5%,tet M的检出率为37.9%,其中,在耐土霉素的100株菌株中,有73%（73/100）,携带超过一种tet基因（包括两种,三种和四种）;其中41%（41/100）编码两种种tet基因,18%（18/100）编码三种tet基因,13%（13/100）编码四种tet基因,只有20%（20/100）编码一种tet基因,有7株对土霉素耐药,但没有检测到任何基因;多药外排泵耐药基因oqx A的检出率为0.5%,oqx B的检出率为1.0%;大环内酯类耐药基因mph E的检出率为2.4%,msr A的检出率为1%;氟苯尼考类耐药基因flo R的检出率为4.9%;喹诺酮类耐药基因qnr D的检出率为1.0%,qnr S的检出率为24.3%;磺胺类耐药基因sul1的检出率为29.6%,sul2的检出率为90.3%。携带tet M的菌株EHP160904的接合子土霉素MIC为4μg/m L,相比受体菌土霉素的MIC（≦0.5μg/m L）,增长多于8倍,携带bla CTX-M的菌株EHP160723的转化子头孢噻呋MIC为0.625μg/m L,相比标准株头孢噻呋MIC（0.078μg/m L）,增长8倍;携带tet M的菌株YHP160513的上游为IS26,ORF13和LP,而下游未定位成功。采用ERIC-PCR对206株HPS进行分子分型。分型结果表明:206株临床分离株中199株可以分型,按80%的相似性可分为18个ERIC-PCR谱型,其中,包含菌株最多的谱型为XIII型有49株;其次依次为VI、VIII、IX、VII型,分别有36、25、26、16株;其它各型菌株数介于2-8株之间;7株不能分型。除耐林可霉素的菌株较均匀分布于12个ERIC-PCR型中外,耐其它药物均有较多的菌株（12株以上）集中于2个或3个ERIC-PCR型中,表明本试验中的耐林可霉素菌株多数来自不同的克隆,其耐药性可能以水平传播为主,而其他药物多数遗传关系很近,以克隆传播为主。