【摘 要】
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第一部分 FIA检测AGEs方法的建立和应用 一 FIA检测AGEs方法的建立 目的 建立糖基化终未产物(advanced glycation end products，AGEs)的一种检测方法。方法 利用高效液
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第一部分 FIA检测AGEs方法的建立和应用 一 FIA检测AGEs方法的建立 目的 建立糖基化终未产物(advanced glycation end products，AGEs)的一种检测方法。方法 利用高效液相色谱仪(high performance liquid chromatography,HPLC)构建流动注射分析系统，检测体外制备的AGEs，并与普通荧光法等进行比较。荧光检测的激发波长和发射波长(Ex/Em)为370/440nm和335/385nm。结果 Ex/Em为370/440nm时，在原反应液的0.1-0.0001浓度范围内仍有良好的线性，Y=67979.98x+4.38，r=0.99999；重复性CV为1.11％；日内、日间CV分别为0.94％和2.51％；平均回收率98.5％；与其它检测AGEs的方法相比，其相互之间测定的数据均有较好的相关性，结果趋势基本一致。Ex/Em 335/385nm与370/440nm结果一致。结论 流动注射分析(Flow injection assay,FIA)是较可靠的检测AGEs水平的新方法。 二 体外蛋白质非酶糖基化的建立 目的 建立可用于药物筛选的体外蛋白质非酶糖基化模型。方法 1、葡萄糖与牛血清白蛋白组成反应系统。37℃孵育1、2周后与NBT反应，用流动注射法于530nm处测定早期糖化蛋白(果糖胺)；2、甘油醛与牛血清白蛋白组成反应系统。37℃孵育2周后用流动注射法于Ex/Em：370/440，335/385nm处测定糖基化终产物；3、3-脱氧葡萄糖醛酮与牛血清白蛋白组成反应系统。37℃孵育1周后用流动注射法于Ex/Em：370/440，335/385nm处测定糖基化终产物。结果 1、反应1和2周后，反应系统内葡萄糖浓度与果糖胺的吸收度值呈显著正相关，分别为：
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