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目的采用具有“清肠燥湿”功效的葛根芩连汤对自发2型糖尿病的ZDF大鼠进行干预,通过检测FBG、FINS、FFA、HbA1c等相关指标,明确葛根芩连汤对早期2型糖尿病的治疗作用,并深入分子水平,观察ZDF大鼠胰腺组织中IRS-2/PI3K/Akt信号通路关键信号因子在给药前后的变化,进一步探讨葛根芩连汤保护胰岛细胞的作用机理。方法24只雄性ZDF(fa/fa)大鼠给予Purina#5008高脂饲料诱导2型糖尿病模型,诱导成功后随机分为葛根芩连汤组、二甲双胍组、模型组,每组8只。8只雄性ZDF(fa/+)大鼠设为正常对照组。模型组、正常对照组给予生理盐水10m L/kg灌胃,葛根芩连汤组给予葛根芩连汤13.8g/kg灌胃,二甲双胍组给予盐酸二甲双胍肠溶片0.16g/kg灌胃。给药8周后,禁食12h,次晨检测FBG后腹主动脉采血并摘取胰腺。血液样本检测FINS、HbA1c等指标。采用蛋白免疫印迹(WB)法以及免疫组化(SP)法检测胰腺组织中IRS-2、p-IRS2、PI3K p85、p-PI3K p85、Akt2、p-Akt2的蛋白表达;实时荧光定量PCR(RTqPCR)法检测胰腺IRS-2、PI3K p85与Akt2 mRNA表达;镜下观察胰腺病理形态的改变。结果1.血液生化检测结果:与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠FBG、FINS、FFA、HbA1c升高(P<0.01);与模型组大鼠比较,二甲双胍组大鼠FBG、FINS、FFA、HbA1c下降(P<0.05或P<0.01),葛根芩连汤组大鼠FBG、FINS、FFA、HbA1c下降(P<0.05或P<0.01)。2.胰岛组织病理形态:正常对照组大鼠胰腺中有大量正常的胰岛分布,组织结构清晰,细胞排列整齐,腺泡小叶完整;模型组大鼠胰腺中仅见少量残存的纤维化胰岛,结构紊乱,腺泡小叶轮廓破坏炎性细胞浸润明显;二甲双胍组大鼠胰腺中有散在新生胰岛分布,腺泡小叶结构较为完整,可见少量炎性细胞浸润;葛根芩连汤组大鼠胰腺中散在新生胰岛分布明显,胰岛数目较模型组明显增加,偶见少量的炎性细胞浸润。3.WB法检测结果:与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠胰腺组织IRS-2、p-IRS2、PI3K p85、Akt2、p-Akt2表达显著降低(P<0.01);与模型组相比,二甲双胍组大鼠胰腺组织IRS-2、p-IRS2、PI3K p85、p-Akt2表达显著升高(P<0.01),葛根芩连汤组大鼠胰腺组织IRS-2、p-IRS2、PI3K p85、p-PI3K p85、Akt2、p-Akt2表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。4.SP法检测结果:与正常对照组大鼠相比,模型组大鼠胰腺组织IRS-2、p-IRS2、PI3K p85、p-PI3K p85、Akt2、p-Akt2蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组大鼠相比,二甲双胍组大鼠胰腺组织IRS-2、Akt2、PI3K p85、p-PI3K p85、p-Akt2蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),葛根芩连汤组大鼠胰腺组织IRS-2、p-IRS2、PI3K p85、pPI3K p85、Akt2、p-Akt2蛋白表达明显升高(P<0.01)。5.RT-qPCR法检测结果:与正常组比较,模型组IRS-2、PI3K p85、Akt2 mRNA表达下降(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,葛根芩连汤组IRS-2、PI3K p85、Akt2和二甲双胍组PI3K p85 mRNA表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论1.胰岛素IRS-2/PI3K/Akt信号通路障碍导致的胰岛细胞损伤与2型糖尿病发病早期“肠道湿热”病机具有相关性。2.“清肠燥湿”法及其代表方葛根芩连汤可能是通过提高胰岛素IRS-2/PI3K/Akt信号转导通路的活性而达到保护胰岛细胞并防治2型糖尿病的目的