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【目的】Statmin1(STMN1)为微管解聚蛋白,通过改变微管的稳定性使得微管骨架蛋白发生重排,从而参与调节细胞周期、迁移、凋亡等过程。既往研究已经证实在多种恶性肿瘤细胞中都可以检测到STMN1高表达,STMN1在宫颈癌和子宫颈上皮内瘤变3级组织中也呈高表达,与临床预后密切相关,然而STMN1与宫颈癌生物学行为及其机制尚缺乏深入研究。本研究第一部分旨在深入探究STMN1对宫颈癌细胞生物学行为的影响及其可能的分子机制。【方法】1、Oncomine数据库检索并分析STMN1基因m RNA水平在宫颈鳞状细胞癌以及正常宫颈鳞状上皮中的表达差异。收集术后病理诊断符合宫颈鳞状细胞癌患者的癌组织和相应癌旁正常组织,提取总RNA,进行逆转录反应,实时定量PCR检测STMN1m RNA表达水平,免疫组织化学染色方法检测两组间STMN1蛋白表达水平差异。2、采用小分子RNA干扰技术沉默宫颈癌细胞系Siha和C33A中STMN1基因的表达,划痕实验、Transwell小室技术检测实验组(si-STMN1)与正常对照组(si-NC)干预C33A和Siha细胞侵袭和迁移能力的影响。3、Real-time PCR与Western blotting技术分别检测比较各组细胞中相关基因m RNA水平和蛋白水平表达情况。【结果】1、Oncomine数据显示:在宫颈鳞状细胞癌组织中,STMN1的表达水平明显高于宫颈鳞状上皮组织中的表达。与配对癌旁组织中的STMN1表达水平相比,宫颈癌患者原发灶组织标本中STMN1 m RNA和蛋白表达水平均明显升高。2、体外实验证实,实验组(si-STMN1)与正常对照组(si-NC)相比下调STMN1表达显著降低宫颈癌细胞的迁移能力及侵袭能力。3、在宫颈癌细胞Siha和C33A中下调STMN1表达后,MMP2和MMP9的m RNA和蛋白表达水平均显著降低。【结论】本研究结果初步提示,STMN1在宫颈癌中高表达,其与宫颈癌细胞侵袭和迁移能力密切相关,可能的机制为:STMN1的高表达水平导致基质金属蛋白酶活性升高,为肿瘤细胞侵袭和迁移提供有利条件。靶向STMN1及其相关下游信号通路可能有助于宫颈癌治疗。【目的】前期研究已经证实在STMN1在宫颈癌细胞的生物学恶性行为中发挥了重要的作用,尤其是对宫颈癌细胞C33A和Siha的侵袭和迁移能力的影响。目前研究表明,STMN1高表达与恶性肿瘤患者不良预后密切相关,还可作为评估多种类型肿瘤的标志物,然而STMN1与宫颈癌耐药的关系和机制尚缺乏深入研究。本研究第二部分旨在深入探究在宫颈癌中的异常表达的STMN1对宫颈癌细胞铂类化疗药物敏感性的影响及其可能的分子机制。【方法】1、采用小分子RNA干扰技术沉默宫颈癌细胞系Siha和C33A中STMN1基因的表达,Cell counting kit(CCK8)实验检测宫颈癌细胞Siha和C33A经过STMN1 si RNA处理后对化疗药物敏感性的影响。2、流式细胞学技术检测铂类化疗药物干预宫颈癌细胞系的同时沉默STMN1的表达对宫颈癌细胞凋亡的影响。3、Real-time PCR与Western blotting技术分别检测比较各组细胞中相关基因m RNA水平和蛋白水平表达情况。【结果】1、CCK8实验证实,与对照组相比下调STMN1表达可增加宫颈癌细胞Siha和C33A对化疗药物(顺铂)敏感性。随着化疗药物(顺铂)浓度逐渐增加,STMN1的表达水平也随之增加。2、流式细胞学技术结果表明沉默宫颈癌细胞Siha和C33A中STMN1表达后宫颈癌细胞系对化疗药物的细胞凋亡率增加3、Western blotting实验结果显示,顺铂处理宫颈癌细胞系后沉默STMN1表达能够明显改变细胞凋亡,表现为凋亡相关蛋白BAX表达水平上调,BCL-2表达水平下调,Cleaved-Casepase3的表达水平上调。【结论】沉默宫颈癌细胞STMN1的表达能增加化疗药物(顺铂)敏感性。其可能的机制为:抑制STMN1表达导致宫颈癌细胞的凋亡增多,从而改善对化疗药物顺铂的敏感性。本研究结果初步提供了STMN1与宫颈癌细胞耐药关系的证据以及可能的潜在机制,靶向STMN1基因为改善宫颈癌化疗药物敏感性提供新的理论科学依据和治疗策略。