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目的:监测大熊猫,特别是大熊猫幼兽的免疫球蛋白的变化情况,以便据此制定出科学的预防接种程序或相应的治疗措施;在配制大熊猫人工初乳时,通过测定母兽冻干血清或乳汁中的IgG浓度,准确地计算血清和乳汁的添加剂量。方法:通过盐析-离子交换法提纯大熊猫血清IgG,利用纯化的IgG免疫家兔,制备抗血清;利用抗原抗体的特异性结合可产生肉眼可见沉淀的原理,建立测定大熊猫血清和乳汁IgG的单向免疫扩散法,并用该方法测定大熊猫血清中IgG和乳汁中IgG浓度。结果:①利用饱和硫酸铵盐析-DEAE葡聚糖法离子交换层析提纯大熊猫血清中IgG,产物经SDS-PAGE电泳(还原状态)后,只呈现两条带,达到电泳纯;②用提纯的大熊猫IgG通过三次免疫家兔制备抗血清,制备的抗血清经琼脂双扩散法检测特异性较好、效价达到1:32;③.通过实验确定最佳抗血清稀释度为1:30,样品最佳稀释度为1:10;标准曲线工作范围为0.226mg/mL～3.611mg/mL,灵敏度为0.113mg/mL,平均批内变异系数为1%;平均批间变异系数为2.7%;样品回收率为103.1%～114.4%;④1岁～20岁共23只大熊猫血清中IgG含量在4.23mg/mL～23.15mg/mL之间;分娩后1日至19日所采集乳汁中IgG浓度在3.54～14.18mg/mL之间。结论:建立的单向免疫扩散法能够较稳定地测定大熊猫血清和乳汁样品中的IgG;成体大熊猫血清中IgG浓度显著高于亚成体大熊猫血清中IgG浓度,乳汁中IgG浓度随着产后天数地增加逐渐下降。