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目的原儿茶醛是天麻和丹参中具有脑保护作用的活性成分之一,能有效对抗大鼠脑缺血/再灌注（Cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI）损伤,作用机制与抗炎、抗凋亡和神经保护有关。药动学研究显示,原儿茶醛灌胃给予正常大鼠吸收迅速,能透过血脑屏障（Blood-brain barrier,BBB）,并且,CIRI的病理状态会影响机体对药物的处置情况。提示,其可能是在脑内发挥的脑保护作用。一般情况下,药物要发挥脑保护作用,除能过BBB在脑组织分布外,还得在脑内达有效浓度和驻留时间。因此,本研究采用高效液相色谱法（High performance liquid chromatography,HPLC）结合微透析取样技术研究原儿茶醛在CIRI模型大鼠血浆和脑组织中的药代动力学特征,为其脑保护作用的作用机制提供参考依据。方法1.原儿茶醛在大鼠体内含量测定方法的建立建立测定大鼠血浆、脑组织和脑透析液中原儿茶醛含量的HPLC分析方法。以专属特异性、线性关系、准确度、日内及日间精密度、稳定性、提取回收率和基质效应等指标进行方法学考察。2.原儿茶醛在CIRI病理状态下的血浆药代动力学特征研究线栓法复制大鼠大脑中动脉阻塞/再灌注损伤（Middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R）模型,采用建立的HPLC分析方法测定原儿茶醛（灌胃:400 mg/kg）在正常大鼠和MCAO/R模型大鼠不同时间点的血药浓度,获得血浆药动学参数,绘制血药经时曲线,通过比较正常和CIRI病理状态下其血浆药动学参数的差异,明确其在CIRI病理状态下的血浆药代动力学特征。3.原儿茶醛在CIRI病理状态下的脑组织药代动力学特征研究3.1原儿茶醛的脑内分布特征研究采用建立的HPLC分析方法结合传统组织匀浆技术,测定平衡相下原儿茶醛（灌胃:400 mg/kg）在正常大鼠和MCAO/R模型大鼠脑内不同区域的分布含量,明确其脑组织分布特征。3.2原儿茶醛的脑药动力学特征研究采用建立的HPLC分析方法结合微透析取样技术,测定原儿茶醛（静注:100 mg/kg）在正常大鼠和MCAO/R模型大鼠局部脑区不同时间点的脑药浓度,获得脑药动力学参数,绘制脑药经时曲线,通过比较正常和CIRI病理状态下脑组织药动学参数的差异,明确其在CIRI病理状态下的脑组织药代动力学特征。4.原儿茶醛在大鼠体内代谢的初步研究在进行2、3研究时,观察到给予原儿茶醛后在实验动物的血浆及脑组织中均出现一峰面积较大的代谢物峰,采用定性的方法,确证这一代谢物峰为原儿茶酸。采用建立的HPLC分析方法检测代谢物原儿茶酸在大鼠血浆和脑组织中不同时间点的浓度变化,绘制药时曲线,获得药动学参数,评价其代谢物在大鼠体内的药动学特征,进一步了解原型药在体内的处置情况。结果1.原儿茶醛在大鼠体内含量测定方法的建立建立的HPLC分析方法的专属性、线性关系、准确度、精密度、稳定性、提取回收率和基质效应等均符合生物样品的分析要求,可用于原儿茶醛在大鼠血浆、脑组织和脑透析液的药代动力学研究。2.原儿茶醛在CIRI病理状态下的血浆药代动力学特征研究灌胃给予原儿茶醛后,正常大鼠体内11 min达血药浓度峰值,AUC（0-t）为10028.52±2119.42μg/L·h,t1/2为5.60 h;MCAO/R模型大鼠体内,7.50 min达血药浓度峰值,AUC（0-t）下降至6924.17±3627.70μg/L·h,t1/2为5.31 h。提示,CIRI的病理状态下,吸收速度加快,吸收的程度有所下降。3.原儿茶醛在CIRI病理状态下的脑组织药代动力学特征研究3.1原儿茶醛的脑内分布特征研究灌胃给予原儿茶醛后,在平衡相下,正常大鼠的脑内分布浓度为:皮层>纹状体>海马>小脑;MCAO/R模型大鼠的脑内分布浓度为:皮层>小脑>海马>纹状体,与正常情况下比,分布浓度均明显提高。提示,平衡相下其在皮层区分布浓度最高,CIRI的病理状态会提高其脑内分布浓度。3.2原儿茶醛的脑药动力学特征研究静注给予原儿茶醛后,正常大鼠皮层区的AUC（0-t）为1295.11±216.57 mg/L·min,Tmax为30 min,t1/2为17.83 min;MCAO/R模型大鼠皮层区的AUC（0-t）为2498.58±128.30 mg/L·min,Tmax为30 min,t1/2为10.35 min。提示,CIRI的病理状态下,其脑内暴露量明显增加。4.原儿茶醛在大鼠体内代谢的初步研究灌胃给予原儿茶醛后代谢物原儿茶酸的血浆药代动力学特征:正常大鼠中,17min达血药浓度峰值,AUC（0-t）为32435.13±11970.01μg/L·h,t1/2为2.29 h;MCAO/R模型大鼠中,13 min达血药浓度峰值,AUC（0-t）为27511.59±15544.33μg/L·h,t1/2延长为2.47 h。提示,灌胃给予原儿茶醛,其代谢物原儿茶酸的血浆暴露量比原型高,考虑原儿茶醛主要代谢为原儿茶酸进行消除。原儿茶酸的脑内分布特征为:灌胃给予原儿茶醛后,在平衡相下,正常大鼠的脑内分布浓度为:皮层>纹状体>小脑>海马;MCAO/R模型大鼠的脑内分布浓度为:皮层>纹状体>海马>小脑。与正常情况下比,分布浓度均有所提高。提示,灌胃给予原儿茶醛后,在脑内也能检测到其代谢物原儿茶酸,并在皮层区分布浓度最高,且CIRI的病理状态会提高其脑内分布浓度。结论CIRI的病理状态下,大鼠灌胃给予原儿茶醛吸收速度加快,吸收程度却下降;脑内暴露量增多;并在血浆和脑组织中可检测到大量的代谢物原儿茶酸,考虑原儿茶醛主要代谢为原儿茶酸进行消除。