急性坏死性胰腺炎肠黏膜损伤质粒示踪细菌易位实验研究

来源 :南华大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zjkghost10
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的采用质粒示踪技术观察ANP大鼠不同时点肠黏膜损伤细菌易位,探讨肠黏膜损伤与细菌易位的相关性,为SAP肠源性感染评估及其防治提供理论依据和实验基础。方法健康SD大鼠n=70,随机(抽签法)分成2组:ANP组(实验组,A组),n=40;SO组(假手术组,S组),n=30。A、S组大鼠再分别按3h、6h、12h、24h、36h时点随机分成5个亚组,A组大鼠各亚组n=8,S组大鼠各亚组n=6。A、S两组大鼠喂饲示踪菌PUC18质粒大肠杆DH-5α每天1次(10 ml/kg)×2d,于喂饲示踪菌第2天开始采集粪便标本×3d。将每次采集的粪便标本置放于含100μg/L氨苄青霉素的LB琼脂培养皿上培养,观察有耐药菌生长后即行细菌扩增、质粒提取、酶切及酶切产物电泳。细菌扩增质粒提取酶切产物与示踪质粒PUC18酶切产物电泳条带相同证实示踪菌已定植。确认示踪菌定植后,A组大鼠逆行胰胆管匀速泵入5%牛磺胆酸钠(0.1ml/100g,0.2ml/min)建立ANP模型,S组大鼠开腹仅翻动十二指肠建立SO模型。两组大鼠均在建模后按3h、6h、12h、24h、36h时点门静脉取血检测血AMY、Ca2+、DAO、ET浓度;观察腹腔大体情况;切取小肠和胰腺组织HE染色行组织病理学检查并行组织病理学评分;肠系膜淋巴结、腹水、门脉血、胰腺组织进行细菌培养及示踪菌的鉴定。结果(1)腹腔大体观察:A组大鼠随时点延长出现胰腺点片状出血、坏死,大片皂化斑,血性、淡红色腹水,胃肠胀气、扩张;S组大鼠各时点均未见上述改变。(2)血AMY:A、S组大鼠比较:A组大鼠各时点血AMY浓度均高于S组各时点, P<0.05。A组大鼠组间各时点比较:①A3h低于A6h、A12h、A24h、A36h,P<0.05;②A6h低于A12h、A36h, P>0.05,A6h低于A24h,P<0.05;③A12h低于A24h、A36h,P>0.05;④A24h高于A36h,P<0.05。S组大鼠组间各时点比较,无统计学差异,P>0.05。(3)血Ca2+:A、S组大鼠比较:A组大鼠各时点血Ca2+浓度均低于S组各时点,P<0.05。A组大鼠组间各时点比较:①A3h高于A6h,P>0.05,A3h高于A12h、A24h、A36h,P<0.05;②A6h高于A12h,P>0.05,A6h高于A24h、A36h,P<0.05;③A12h高于A24h、A36h,P>0.05;④A24h高于A36h,P>0.05。S组大鼠组间各时点比较,无统计学差异,P>0.05。(4)胰腺组织病理学检查(HE染色):A组大鼠:①A3h:胰腺组织轻度水肿,腺泡细胞轻度肿胀,点状出血,少量炎症细胞浸润,腺叶结构正常;②A6h:胰腺组织中度水肿,腺泡细胞肿胀明显,片状出血,较多炎症细胞浸润,腺叶结构轮廓尚清晰;③A12h:胰腺组织水肿明显,腺泡细胞肿胀明显,片状出血及少量坏死,大量炎症细胞浸润,部分腺叶正常结构消失;④A24h:胰腺组织水肿、出血及坏死明显,大量炎症细胞浸润,大部分腺叶正常结构消失;⑤A36h:胰腺组织大部分出血及坏死,大量炎症细胞浸润,腺叶正常结构基本消失。S组大鼠:胰腺组织未见上述病理改变。(5)小肠组织病理学检查(HE染色):A组大鼠:①A3h:肠绒毛排列整齐,轻度水肿,无顶部上皮细胞脱落,肠上皮下间隙正常,少量炎性细胞浸润;②A6h:肠绒毛中度水肿,顶部上皮细胞一部分脱落,肠上皮下间隙扩大,较多炎性细胞浸润;③A12h:肠绒毛排列不整齐,水肿明显,顶部上皮细胞部分脱落,肠上皮下间隙扩大,大量炎性细胞浸润;④A24h:肠绒毛顶部上皮细胞大量坏死脱落,肠上皮下间隙明显扩大,大量炎性细胞侵润;⑤A36h:肠绒毛变短,排列不规则并两两融合,顶部上皮细胞大量坏死脱落、局灶性溃疡,肠上皮下间隙明显扩大,大量炎性细胞浸润。S组大鼠:小肠组织未见上述病理改变。(6)胰腺组织病理学评分:A、S组大鼠比较:A组大鼠各时点评分均高于S组相应时点, P<0.05。A组大鼠组间各时点比较:①A3h低于A6h、A12h、A24h、A36h ,P<0.05;②A6h低于A12h、A24h、A36h ,P<0.05;③A12h低于A24h、A36h ,P<0.05;④A24h低于A36h ,P<0.05。S组大鼠组间各时点比较,无统计学差异,P >0.05。(7)小肠组织病理学评分: A、S组大鼠比较:①A3h高于S3h, P>0.05;②A6h、A12h、A24h、A36h均高于S组相应各时点,P<0.05。A组大鼠组间各时点比较:①A3h低于A6h、A12h、A24h、A36h ,P<0.05;②A6h低于A12h、A24h、A36h ,P<0.05;③A12h低于A24h、A36h ,P<0.05;④A24h低于A36h , P>0.05。S组大鼠组间各时点比较,无统计学差异,P>0.05。(8)血DAO浓度:A、S组大鼠比较:A3h高于S3h,P >0.05;A6h、A12h、A24h、A36h均高于S组同时点,P<0.05。A组大鼠组间各时点比较:①A3h低于A6h、A12h、A24h、A36h ,P<0.05;②A6h低于A12h, P>0.05,A6h低于A24h、A36h ,P<0.05;③A12h低于A24h、A36h ,P<0.05;④A24h低于A36h , P>0.05。S组大鼠组间各时点比较,无统计学差异,P >0.05。(9)血ET浓度:A、S组大鼠比较:A3h高于S3h,P >0.05;A6h、A12h、A24h、A36h均高于S组同时点,P<0.05。A组大鼠组间各时点比较:①A3h低于A6h、A12h、A24h、A36h ,P<0.05;②A6h低于A12h、A24h、A36h,P<0.05;③A12h低于A24h、A36h,P<0.05;④A24h低于A36h,P>0.05。S组大鼠组间各时点比较,无统计学差异,P >0.05。(10)细菌培养:A3h肠系膜淋巴结、腹水、门脉血、胰腺组织细菌培养均呈阴性结果;A6h肠系膜淋巴结细菌培养阳性,腹水、门脉血、胰腺组织培养为阴性;A12h肠系膜淋巴结、腹水细菌培养阳性,门脉血、胰腺组织培养为阴性;A24h、A36h肠系膜淋巴结、腹水、门脉血、胰腺组织细菌培养均呈阳性。S组大鼠各时点肠系膜淋巴结、腹水、门脉血、胰腺组织细菌培养均呈阴性。A组大鼠组间各时点肠系膜淋巴结、腹水、门脉血、胰腺组织细菌培养总阳性率比较:①A6h低于A12h,无显著性差异,A6h低于A24h、A36h,有显著性差异;②A12h低于A24h,无显著性差异,A12h低于A36h,有显著性差异;③A24h低于A36h,无显著性差异。(11)相关性分析:①A组大鼠胰腺组织病理学评分与小肠组织病理学评分呈正相关关系,P<0.05;②A组大鼠血浆DAO浓度与小肠组织病理学评分呈正相关关系,P<0.05;③A组大鼠血浆ET浓度与小肠组织病理学评分呈正相关系, P<0.05;④A组大鼠血浆DAO浓度与血浆ET浓度呈正相关关系,P<0.05。结论(1)大鼠ANP成模后6h出现肠黏膜损伤,损伤程度随时点延长加重,细菌易位率随时点延长升高。(2)大鼠ANP成模后6h肠系膜淋巴结检出示踪菌,早于腹水及门脉血示踪菌检出时间。
其他文献
电动操作器是电动单元组合仪表中的一个辅助单元,一般安装在控制台上,主要用来完成电动执行机构手动、自动之间的无扰动切换任务,同时具有远距离操作,阀位指示,中途限位等功
利用各种运动控制电路、开发工具和实时软件,你设计的嵌入式产品可以真正地动起来。 With a variety of motion control circuits, development tools and real-time softwa
目的:   1、探讨嗜热吸水链霉菌是否为大棚作业农民肺的致病菌并探讨诱导大棚肺动物模型的嗜热吸水链霉菌抗原的最适宜剂量。   2、比较雾化吸入和鼻内滴注嗜热吸水链
光敏器件是一种应用范围相当广的敏感元件。光是既有波动性又有微粒性的一种物质。光的粒子性表现在光电效应上,当一个光子射入到半导体中时,可将它的能量转移给电子,电子吸
高粱具有抗旱、耐涝、耐盐碱等特性,是个旱涝保收的稳产作物。高粱根系发达,入土较深,根的内皮层有硅质沉淀物,使根坚韧,可以承受土壤缺水时收缩的压力,在干旱条件下能较好
目的:   通过对我院儿科住院治疗的非嗜肝病毒感染原相关性肝炎患儿临床特征的分析,总结该病的主要感染源、临床特点,以提高诊治水平,提高确诊率、治愈率及减少住院时间。
目的:通过ROC曲线比较超声造影、增强CT对肝脏恶性病变的诊断价值。   方法:60例肝局灶性占位病人进行增强CT检查,由放射科高级医师做出5级法诊断:是、可能是、不清楚、可能
本文通过对荣华二采区10
本文论述了我们研制的一种适用于强电磁场下高阻导线温度传感器的设计原则,并将它与常规的热电偶和热敏电阻(具有铜信号线)温度传感器的性能进行了理论分析和比较,最后通过对
本文提出了用于解决一般树形多体结构动力学问题的偏速度综合法.该方法综合了Kane方法和多体动力学中的递归法的优点,它不仅使最终的运动微分方程维数最小,而且便于用计算机